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肽键的形成 Tu\Ts循环 Ts Ts-GDP 多多核糖体与核糖体循环 合成完毕的肽链 多核糖体 3ˊmRNA 延伸中的肽链 5ˊ 核糖体循环 真核生物多肽链的合成(自学) 1、真核细胞核糖体比原核细胞核糖体更大更复杂; 2、起始氨基酸为Met,不是fMet; 3、肽链合成的起始:由40S核糖体亚基首 先识别mRNA的5’端-帽子,然后沿mRNA移动寻找AUG; 4、起始因子有12种,但只有2种延长因子和1种终止因子; 5、真核细胞种线粒体、叶绿体的核糖体大小、组成及蛋白质合成过程都类似于原核细胞。 肽链折叠是指从多肽链的氨基酸序列形成具有正确三维空间结构的蛋白质的过程。 体内多肽链的折叠目前认为至少有两类蛋白质参与,称为助折叠蛋白: (1)酶:蛋白质二硫键异构酶(PDI); (2)分子伴侣 肽 链 的 折 叠 Lasky于1978年首先提出分子伴侣(mulecular chaperone)的概念,这是一类在细胞内能帮助新生肽链正确折叠与装配组装成为成熟蛋白质,但其本身并不构成被介导的蛋白质组成部分的一类蛋白因子,在原核生物和真核生物中广泛存在。 1、肽链末端的修饰: N-端fMet或Met的切除 2、信号序列的切除 3、二硫键的形成 4、部分肽段的切除 5、个别氨基酸的修饰 6、糖基侧链的添加 7、辅基的加入 蛋白质的加工修饰 实例:胰岛素原的加工 胰岛素原的加工 A链区 B链区 间插序列(C肽区) HS SH SH SH HS HS 信号肽 N C 核糖体上合成出无规则卷曲的前胰岛素原 切除C肽后,形成成熟的胰岛素分子 切除信号肽后折叠成稳定构象的胰岛素原 S S S S N N C C A链 B链 胰岛素 C N S-S S S 胰岛素原 S S 多核糖体 第一个编码区 第一个编码区 第二个编码区 第二个编码区 终止\起始 终止 起始 mRNA mRNA 5′ 5′ 3′ 3′ 第四节 蛋白质定位 1、分泌蛋白 ● 信号肽假说简图 ● 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 2、线粒体与叶绿体蛋白 ● 蛋白质向线粒体的定位机制 信号肽假说简图 3ˊ 5ˊ SRP循环 mRNA 内质网膜 内质网腔 信号肽酶 信号肽 一些真核细胞多肽链上N-端的信号肽的结构 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 内质网 高尔基体 泡 泡 泡融入质膜 核糖体 芽泡 线粒体外膜 线粒体内膜 带有导肽的线粒体蛋白质前体跨膜运送过程示意图 内外膜接触位点的蛋白质通道 线粒体hsp70 受体蛋白 hsp70 导肽 蛋白酶切除导肽 问答题 1、试述遗传中心法则的主要内容。 2、遗传密码如何编码?简述其基本特点。 3、mRNA、tRNA、rRNA在蛋白质生物合成中各具什么作用? 4、肽链合成后的加工处理主要有哪些方式? 5、试比较下列生物分子结构单元的激活机制: 蛋白质 脂肪酸 多糖 名词解释 中心法则 遗传密码 密码子 简并性 翻译 冈崎片段 多核糖体 缺失或插入核苷酸引起三联体密码的改变 CAT CAT CAT CAT CAT CAT CAT CA?C ATC ATC ATC ATC CAT CA?C AXT CAT CAT CAT CAX TXC ATX CAT CAT CAT -1 -1,+1 +3 以均聚物为模板指导多肽的合成 Poly U 为模板,产生的多肽链为Poly Phe 苯丙氨酸 Poly A 为模板,产生的多肽链为Poly Lys 赖氨酸 Poly C 为模板,产生的多肽链为Poly Pro 脯氨酸 以特定的共聚物为模板指导多肽的合成 (1)以多聚二核苷酸作模板可合成由2个氨基酸组成的多肽 ,如以Poly UG 为模板,合成产物为Poly Lys-Val(赖氨酸-缬氨酸)。 (2)以多聚三核苷酸作为模板,可得三种氨 基酸组成的多肽。 核糖体结合技术 技术要点: 保温 硝酸纤维滤膜过滤 分析留在滤膜上的核
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