基因工程概况课件.pptVIP

基因工程概况 吴传芳 E－mail：wuchuanfang @ 课程内容 绪论 第一章 分子克隆工具酶 第二章 分子克隆载体 第三章 基因的克隆与鉴定 第四章 PCR技术 第五章 基因突变技术 第六章 基因芯片技术 第七章 外源目的基因的表达与调控 参考书 基因工程原理 吴乃虎 基因工程 孙明 高等教育出版社 基因工程概论 张惠展 分子克隆 生物学期刊杂志 能否让热带鱼也能发光? 设想 能发荧光的热带斑马鱼 普通热带斑马鱼是不发荧光的 抗虫害的玉米 抗虫棉 能产生人胰岛素的大肠杆菌 从大肠杆菌说起－－胰岛素 胰岛素 每100kg 猪或牛的胰腺中提取 4~5g胰岛素 1979年，利用大肠杆菌的DNA分子重组，2000L培养液提取100g ， 相当于2吨猪胰腺中提取的量 　　将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素！大规模工业化生产不但解决了这种比黄金还贵的药品产量问题，还使其价格降低了30%-50%! 从大肠杆菌说起－－干扰素 干扰素 一千克纯的干扰素价值可达440亿美元。 传统生产方法：血液中提出白细胞，然后用病毒去感染它，这时会产生干扰素，1个细胞最多生产100~1000个干扰素分子 基因工程：改造的大肠杆菌发酵生产：一天内便可生产20万个干扰素分子。1KG培养物中可以得到20~40mg干扰素 思考： 1、为什么能把一种生物的基因“嫁接”到另一种生物上？ 2、推测这种“嫁接”怎样能实现？ 3、这种“嫁接”对品种的改良有什么意义？ 主要内容 1.基因工程的基本概念 2.基因工程的理论依据 3.基因操作的基本步骤 4.基因工程的发展历史 5.基因工程研究内容 6、转基因生物与转基因食品的安全性 1.基因工程的基本概念 重组DNA技术 重组DNA技术是指将一种生物（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。 因此，供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件 基因工程含义 基因工程（Gene Engineering）： 利用DNA体外重组或PCR扩增技术从某种生物基因组中分离靶基因,或是用人工合成的方法获取基因,然后经过一系列切割,加工修饰,连接反应形成重组DNA分子,再将其转入适当的受体细胞,以期获得基因表达的过程. 基因工程指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。 二、基因工程的理论依据 不同的基因具有相同的物质基础 基因是可以切割的 基因是可以转移的 多肽与基因间存在对应关系 遗传密码是通用的 基因可以通过复制把遗传信息传递到下一代 四个基本步骤： 三基因操作的基本步骤 1）提取目的基因 2）目的基因与运载体结合 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测和表达 四． 基因工程的发展历史 1）准备阶段 19世纪中 孟德尔 豌豆杂交试验 遗传因子 经典遗传学 20世纪初 莫尔根 果蝇杂交试验 基因 基因学 1944年 艾弗瑞 肺炎双球菌转化实验 遗传物质DNA 1953年 沃森－克瑞克 DNA双螺旋结构 —搞清了遗传物质的分子机制 1958年至1971年确立中心法则，破译64种遗传密码—使遗传学在分子水平上得到解释。 1972 年美国Berg, Jackson 等人将猿猴病基因组 SV40 DNA , 噬菌体基因，大肠杆菌半乳糖操纵子，体外重组获得成功。 四． 基因工程的发展历史 2）问世阶段 1973 年美国斯坦福大学 Cohen, Boyer 等，在体外构建含有 四环素，链霉素，两个抗性基因的重组质粒分子,导入大肠杆菌后稳定复制，赋予受体 细胞 相应 抗生素抗性。 同时与别人合作将非洲爪蟾含核糖体基因的DNA片段与质粒重组，转化大肠杆菌，转录出相应的RNA -----（宣告基因工程诞生） 四． 基因工程的发展历史 3）发展阶段 1978年美国Genentech公司利用重组大肠杆菌合成人胰島素的先进生产工艺--------（揭开基因工程产业化的序幕） 1983年，携带有细菌新霉素抗性基因的重组Ti 质粒转化 植物细胞获得成功。 1990年，美