抗菌药物敏感性试验及2010CLSI课件.pptVIP

药敏试验及2010年CLSI更新 华中科技大学同济医院 朱旭慧 细菌耐药性变迁—G+ 金葡菌 MRSA VISA VRSA CA-MRSA 青霉素不敏感肺炎链球菌 PISP PRSP 耐万古肠球菌 VRE（vanA vanB vanC） 肠杆菌科细菌 大肠、肺克、奇异变形杆菌产ESBLs，AmpC酶等 大肠埃希菌－耐FQ 耐第三代头孢、碳青霉烯类革兰阴性杆菌 多重耐药及泛耐药菌－不动杆菌属、绿脓、肠杆菌科细菌中的某些种 细菌耐药性变迁—G- 细菌药敏试验的重要性 细菌耐药性仍呈增加趋势 加强对耐药菌的检测、耐药菌带菌者的筛查和耐药机制研究 正确合理选用抗菌药和控制耐药菌感染 正确的药敏试验及报告非常重要！ 如何进行药物敏感性试验？ 纸片扩散法 Kirby-baure(K-B)法） 稀释法 试管稀释法（肉汤稀释法 平板稀释法（琼脂稀释法） E-Test 细菌报告应注意的问题 有无细菌：苛养菌、难培养细菌 正常菌群/病原菌:病史、病人体征、感染部位 药敏结果报告：耐药菌株的提示或修改 完全抑制的抑菌圈直径，包括纸片的直径 不反光的黑色背景、反射光下阅读结果 抑菌圈的界限应该是以肉眼观察没有明显的可见细菌生长区域 在抑菌圈边缘微弱生长的、仅能在放大镜下才能观察到的细小菌落应忽略 正确阅读纸片法结果 正确阅读抑菌圈内的“霾”现象 变形杆菌(迁移生长)以及磺胺类药物的纸片法药敏 注意要读完全抑制的抑菌圈，对“霾”生长不予理会 克林霉素对葡萄球菌的抑菌圈内如有薄雾状菌苔应报告细菌对克林霉素耐药,不管其是否显示 “D”抑菌圈 需在透射光（Transmitted light）下阅读万古霉素、利奈唑胺和苯唑西林的抑菌圈，遇不敏感的结果需用稀释法测定MIC法确证 E-test试验结果阅读 忽略溶血，读取生长完全被抑制处 MIC 0.032ug/ml 杀菌型药物如氨基糖苷类产生“干脆利落”椭圆球 MIC 0.064ug/ml 试条两边产生不同的交界点，读取较高数值侧的MIC。如果两侧差＞1个稀释度，则须重复试验。 MIC 0.5ug/ml 忽略变形杆菌的迁延现象，MIC 0.064ug/ml 哪些需要做MIC 肺炎链球菌 苯唑西林纸片法直径≤19mm,需要明确受试菌对青霉素的敏感性，必须做青霉素的E-试验 革兰阳性球菌 万古霉素不敏感时（中介或耐药），必须做万古霉素的E-试验确认受试菌对万古霉素的敏感性（包括替考拉宁、利奈唑胺等） 草绿色链球菌 对青霉素、氨苄西林 纸片法药敏结果不可靠，必须做上述 两药的E-test 葡萄球菌：某些情况下，对万古霉素 纸片法的分辨率低 Clinical Infectious Diseases 2007; 44:1536–42 万古霉素的MIC方法为常规药敏试验的方法 2009 2008 2009年取消了万古霉素对葡萄球菌纸片法药敏 增加万古霉素剂量不能改善临床疗效 大剂量万古霉素治疗医院获得性MRSA感染， MIC=2μg/mL仍导致高治疗失败率 Hidayat LK et al. Arch Int Med. 2006;166:2138-2144. 一项单中心、前瞻性研究，对95例罹患医院MRSA感染的住院或住护理院的老年患者静脉滴注万古霉素，对临床疗效、死亡率、肾毒性进行评价 *到达目标：万古霉素血浆谷浓度达到15-20μg/mL；?治疗反应：患者发热、白细胞增多症状部分或完全缓解 治疗反应 ?(%) P=0.02 85% 62% 总体 MIC ≤1 MIC=2 耐青霉素肺炎链球菌的检测 苯唑西林：1ug/片 抑菌圈直径≥20mm为青霉素敏感株（ MIC≤0.06ug/ml ） 抑菌圈直径≤19mm可能为青霉素耐药、中敏或敏感株，必须进行青霉素MIC测定。 肺炎链球菌对青霉素药敏试验的判断标准 (mcg/ml) 2008版！ M100-S18 Table 2G 敏感 中介 耐药 青霉素（非脑膜炎） ≤2 4 ?8 青霉素（脑膜炎） ≤0.06 - ?0.12 青霉素（口服青霉素 V） ≤0.06 0.12-1 ?2 2007版 ! M100-S17 Table 2G 青霉素 ≤0.06 0.12-1 ?2 对于三个青霉素的判断标准我们都应该解释和报告吗？ 青霉素判断标准 解释/报告？ 脑膜炎 是的，脑脊液标本 非脑膜炎 是的，其他的标本，因为我们通常不能确定该感染是否涉及脑膜 口服青霉素V 可能不需要，如果你们实验室不用口服青霉素（阿莫西林经常被用做口服青霉素的首选） 不可能出现的药敏结果 同一株细菌不可能出现的矛盾的药敏结果 金葡菌：青霉素S，苯唑西林R；万古霉素R 肠球菌：万古霉素S，替考拉宁R 肠杆菌科细菌