中国药科大学生物化学要点.doc

第一篇 生物大分子的结构与功能 第一章 氨基酸与多肽化学 一、1、氨基酸（AA）是蛋白质水解的最终产物，也是组成蛋白质结构的基本单位，由5种元素组成，即碳、氢、氧、氮、硫。 2、常见的蛋白质氨基酸也就是组成蛋白质的20种氨基酸称基本氨基酸，也称编码氨基酸。 3、常见氨基酸的分类： 按侧链R基的极性：1）极性氨基酸（不带电荷）甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺（带正电荷）赖氨酸、精氨酸、组氨酸（带负电荷）天冬氨酸、谷氨酸 2）非极性氨基酸 丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸。 4、20种氨基酸的结构特点：①均为L-氨基酸②均为α氨基酸，脯氨酸除外③α-碳原子为不对称碳原子，甘氨酸除外④各种aa的R基侧链各不相同 5、aa是一种两性电解质，不同pH时氨基酸以不同的离子化形式存在。 6、aa的等电点（pI）：在某一pH溶液中，aa解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时溶液的pH称为该aa的等电点。pI=1／2（pK1+pK2）。pK1对应羧基pK2对应氨基。Aa在pI时溶解度最小。最稳定，在酸碱条件下溶解度增加。用途：分离、纯化。 7、aa的甲醛滴定 （应用：定量分析）直接滴定终点pH过高（12），没有适当指示剂；与甲醛反应，终点在9左右，可用酚酞作指示剂，释放一个氢离子，相当于一个氨基，摩尔比1:1简单快速，一般用于测定蛋白质是水解速度。 8.特征化学反应 1）α-氨基参加的：①成盐作用②亚硝酸的反应：用来检测蛋白质水解的程度；水解越完全，放出的α-氨基酸越多，与亚硝酸反应放出的氮气越多。③与2,4-二硝基氟苯（DNFB）：鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸；④与丹磺酰氯（DNS-Cl）：作用同③；⑤与苯异硫氰酸（PITC）：同上。 2）α-羧基参加的：成盐和成酯 3）二者共同参加的—茚三酮反应：aa与水和茚三酮一起加热，生成蓝紫色化合物，在570nm处有最大吸收，可用作aa含量分析；另外，还可以发生成肽键反应。 4）侧链R基参加的呈色反应 ①米伦反应：酪氨酸及含酪氨酸的蛋白质，红色②福林反应（磷钼酸+磷钨酸）：碱性条件下，酪氨酸及含酪氨酸的蛋白质，蓝色③Sakoguchi反应（碱性次溴酸钠+α-萘酚）：精氨酸，红色④Pauly反应（5%对氨基苯磺酸盐酸溶液+亚硝酸钠+碳酸钠）：组、赖氨酸（0~4 ℃），橘红色⑤乙醛酸反应（乙醛酸+浓硫酸）：色氨酸，紫红色⑥半胱氨酸的反应：与亚硝酸-铁氰化钠的甲醇溶液，红色 9、必需氨基酸：人体体内自身不能合成，必须从食物中获得。成人有8种：甲硫、缬、赖、色、苏、苯丙、亮、异亮。婴儿期所需：精、组 10、氨基酸的分离方法：①溶解度和等电点法②特殊沉淀剂法③离子交换法④电渗析法 11、氨基酸的分析方法：①纸色谱法②薄层色谱③高效液相色谱④离子交换色谱⑤氨基酸自动分析仪法⑥质谱 12、氨基酸的生产方法： 1)水解法：①酸水解法：6-10M的盐酸，在110-120℃下水解12-24小时；优：水解彻底，氨基酸不消旋；缺：色氨酸完全被破坏，天冬酰胺和谷氨酰胺去氨化。②碱水解法：4-6M氢氧化钠或2-4M的氢氧化钡在100-110℃水解6-24小时；优：水解完全，色氨酸不被破坏；缺：氨基酸易消旋，丝氨酸、精氨酸、苏氨酸、胱氨酸等大部分被破坏。③酶水解法：蛋白酶，；优：反应条件温和，氨基酸不被破坏，不消旋；缺：水解被彻底。 2）微生物发酵法3）化学合成法：产物为消旋体，需进行拆分4）酶合成法：化学合成法配制基质，利用酶促反应 13、肽键：一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基之间失水形成的酰胺键。 多肽：是由氨基酸通过肽键连接而成的多聚化合物。多肽分子中肽键数等于失去的水分子数。 肽单位：由肽键中的四个原子和与之相邻的两个碳原子共同构成的刚性平面，也称肽平面。 14、肽：氨基酸通过肽键相连形成的化合物。10个以内aa连成的肽称寡肽，10个以上多肽。 15、共价主链：多肽链中的骨干是由氨基酸的羧基与氨基形成的肽键部分有规则地重复排列而成，成为共价主链。R基部分成为侧链。氨基酸残基：组成肽链的氨基酸在参与形成肽键之后，脱水而结构不完整，此部分称···多肽链的结构具有方向性，从氨基端开始到羧基端。 16．、多肽的物理性质：相对分子量低于一万的成多肽，高于一万的称蛋白质，界限不是很严格。水溶性大于蛋白质，旋光性等于各个氨基酸残基的旋光度之和。 17、化学性质：两性电离和等电点；紫外吸收；侧脸金属螯合；呈色反应：茚三酮反应；双缩脲反应：含两个以上肽键的化合物在碱性溶液中与硫酸铜作用呈紫色；米伦；酚试剂。 18、重要多肽：血液中的谷胱甘肽具有抗氧化和解毒作用；加压素具有抗利尿、调节心血管功能、增强记忆、镇痛、促进肝糖原分解；促甲状腺释放因子（T