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动物细胞融合与单克隆抗体 温故知新： 植物体细胞杂交的过程是怎样的？ 去细胞壁 纤维素酶、果胶酶 筛选 一、动物细胞融合（细胞杂交） 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性 4、诱导方式 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 生物法： 灭活的病毒 （丧失感染性、保留抗原结构） 5、过程： 6、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较： 比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用法 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 去壁后诱导原生质体融合 物理法（离心、振动、电激）化学法（聚乙二醇 获得杂种植株 动物细胞融合 细胞膜的流动性 使细胞分散后诱导细胞融合 除以上方法，还有生物法 制备单克隆抗体 7、意义及用途 ⑴打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； ⑵广泛应用多个学科领域； ⑶重要用途：制备单克隆抗体。 1 抗体是由何种细胞产生的？ 2 抗体是如何产生的？ 二、单克隆抗体 3 传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 产量低、纯度低；而且制备抗体特异性差。 4 B淋巴细胞与抗体的关系 　⑴．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异性抗体。 　⑵．动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可 达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　⑶．但每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。　 　⑷.在体外，一个Ｂ淋巴细胞是不可能无限增殖的。　 （一）、单克隆抗体的概念 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 （二）、单克隆抗体的制备 1、设计方案： 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖 杂种细胞 动物细胞培养技术 动物细胞融合 单克隆抗体 既能产生特异性抗体，又能大量繁殖 1、设计方案： 动物细胞融合技术 B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤 只有杂种细胞才能活 动物细胞培养 2.单克隆抗体制备过程 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 思考： ①对小鼠做何处理？ ②细胞融合后，培养液中共有几种细胞？有几种融合细胞？ ③杂交瘤细胞的特点：既能无限 ，又能产生 。 ④两次筛选的目的是什么？ 注射特定的抗原蛋白 五种（B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B-B、骨－骨、杂交瘤细胞）其中三种融合细胞。 繁殖 特定的抗体 与常规抗体相比，单克隆抗体特异性强，灵敏度高。 应用： 特点： １可用于作为诊断试剂：有准确，高效，快速的优点 ２可用于疾病治疗 ３可用于运载药物（作为运载对应疾病的药物的“生物导弹”）　“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物 （三）单克隆抗体的应用 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 ——灭活病毒 一个新细胞——杂交瘤细胞 一个优势——单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势 小结 右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗？　　。原因是　　 　 　。　（2）图中②为　　　过程，常用_ 　　　　作为诱导剂。该细胞继承了　 　 　，因此不仅能分泌　 　　 ，还有_ 　　 　　本领。（3）该方案的目的是　　 。 不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞. 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 在体外培养条件下大量增殖 制备单克隆抗体 练习 作业 1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？ 2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？