第9章酶促反应动力学要点.ppt

浓度对酶反应速率的影响 抑制剂对酶反应速率的影响 温度对酶反应速率的影响 pH对酶反应速率的影响 激活剂对酶反应速率的影响 酶促反应动力学是研究酶促反应的速率以及影响此速率的各种因素的科学。 化学动力学的研究内容具体为确定反应速率，了解浓度、温度、pH值、催化剂等因素对反应速率的影响，揭示化学反应机制。 反应速率：单位时间内反应物或者生成物浓度的改变。 v=(±)dc/dt 一、化学动力学基础 化学反应 化学反应的方向、可能性和限度 化学反应的速率和机制 化学热力学(结果) 化学动力学（过程） 反应速率：单位时间内反应物或者生成物浓度的改变。 1. 反应速率及测定 v=(c2-c1)/(t2-t1)= -dc/dt 监测反应物的浓度变化： 监测生成物的浓度变化： v=(c2-c1)/(t2-t1)= dc/dt 反应分子数 反应级数 整个化学反应的速率服从哪种分子反应速率 单分子反应 A →P 例如：放射性元素的蜕变、分子重排、 同分异构体互变等。v=-dc/dt=kc 双分子反应 A+B →P+Q 例如：2H2+O2 →2H2O; v=-dc/dt=kc1c2 一级反应 v=-dc/dt=kc 二级反应 v=-dc/dt=kc1c2 零级反应 v=-dc/dt=k 例如酶促反应的最大速度 2. 反应分子数及反应级数 反应中真正相互作用的分子数目 总反应速率与浓度的关系能以单分子反应的速率 方程式表示。注意：水解反应（双分子、一级反应） 以双分子反应的速率方程式表示；反应速率与反应物质浓度二次方成正比 反应速率与反应物浓度的关系分类 3. 各级反应的特征： 1. 一级反应： t1/2 ≈0.693/k 不论反应物初浓度的多少，其半衰期是一样的 2. 二级反应 t1/2=1/ka 初浓度越大，反应物减少一半所需时间越短 3. 零级反应 t1/2=a/2k 初浓度越大，半衰期越长 v=-dc/dt=kc v=-dc/dt=kc1c2 v=-dc/dt=k 概念 酶促反应动力学是研究酶促反应的速率以及影响此速率的各种因素的科学，是酶工程研究中的一个重要内容。 影响因素包括有 酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。 研究一种因素的影响时，其余各因素均认为恒定。 二、酶促反应动力学 [S] v Henri的蔗糖水解实验 ——保持酶浓度不变 1903 年Henri用蔗糖酶水解蔗糖研究底物浓度与反应速率的关系，当保持酶浓度不变时，得到双曲线图，并提出酶底物中间络合学说。 2.1 底物浓度对酶反应速度的影响 2.1.1 中间络合物学说 酶与底物先络合成一个过渡态络合物，然后络合物进一步分解为产物和游离态酶。这个学说的前提是酶与底物反应的“快速平衡”，即在反应的开始阶段，两者反应速度很快，迅速建立平衡关系。 第一步：酶（E）与底物（S）作用，形成酶-底物中间产物 （ES）：E+S←→ES (k1和k2是正、逆反应的速度常数) 第二步：中间产物分解，形成产物（P），释放出游离酶(E)： ES←→P+E 许多实验事实证明了E－S复合物的存在，E－S复合物形成的速率与酶和底物的性质有关。 酶和底物中间复合体的证据： ES复合物已经被电子显微镜和X射线晶体结构分析直接观察到； 酶和底物形成ES复合物后光谱特性发生改变； 形成ES复合物后，酶的物理性质，例如溶解度或热稳定性发生改变； 某些酶和底物相互作用的ES复合物已经得到分离； 酶和底物可形成共沉淀。 在底物浓度低时, 酶未被饱和，反应速度V 取决于底物浓度，与底物浓度[S]成正比，表现为一级反应特征。 2.1.2 酶被底物饱和现象和“中间络合物”假说 E + S ? ES ? E + P 一级反应 [S] v E Henri的蔗糖水解实验 ——保持酶浓度不变 随着底物浓度的增高, ES生成量多，反应速率取决于ES浓度，而反应速度不再成正比例加速；反应为混合级反应。 v 混合级 E [S] E + S ? ES ? E + P Vmax v 零级反应 E 当底物浓度达到相当高时，底物浓度对反应速率影响变小，最后反应速率与底物浓度无关，反应达到最大速率 Vmax。只有酶的催化反应具有这样的饱和现象。 E + S ? ES ? E + P 2.2 酶促反应动力学 （1）米氏方程 1913年，德国化学家Michaelis和Menten根据中间络合物学说对酶促反应的动力学进行研究，推导出了表示整个反应中底物浓度和反应速度关系的著名公式，称为米氏方程。 Km — 米氏常数 Vmax — 最大反应速度 米氏方程—— Michaelis和Menten根据中间复合物学说