第3章转录及其调控(药学本科)-2012要点.ppt

第3章 转录及其调控 中心法则 The Central Dogma 逆转录 复 制 转 录 翻 译 本章主要内容OVERVIEW 转录的概念； 复制与转录的异同点； 原核生物RNA聚合酶的组成结构特点； 真核生物RNA聚合酶的种类及特点； 原核生物及真核生物启动子结构及特点； 转录的基本过程； 真核生物转录后的修饰. 目的要求 掌握： 转录的概念；复制与转录的异同点；原核生物RNA聚合酶的组成结构；真核生物RNA聚合酶的种类及转录的产物；启动子的概念，原核生物及真核生物启动子结构及特点；终止子的概念、不依赖rho因子的终止子的特点；顺式作用元件，反式作用因子；真核生物转录后修饰的几种方式；核酶。 熟悉： 转录的基本过程；原核生物两类终止子的结构特点；编码链，模板链；帽子的形成过程；stem-loop 结构。 概述overview 转录 (transcription) 是生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 转录 RNA DNA 1、基本概念 2、转录与DNA复制的异同 均以DNA为模板 均需要依赖DNA的聚合酶 均以含三个磷酸的核苷酸为原料 均是核苷酸聚合过程，多核苷酸为产物 均遵从碱基配对规律 A-U；G-C （1）复制和转录的相同点 （2）复制和转录的不同点 3、参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA 酶: 依赖DNA的RNA聚合酶(RNA polymerase) 其他蛋白质因子 图12-1 RNA链中3’,5’-磷酸二酯键的形成 RNA的合成的方向为5’→3’；聚合反应是通过核苷酸之间形成的3’,5’-磷酸二酯键，使核苷酸链延长，同时释放出焦磷酸。 4、转录的规律 不对称转录(asymmetric transcription) 图 12-2 RNA 的不对称转录 5、转录模板 DNA分子上转录出RNA的区段，称为结构基因(structural gene)。 转录的这种选择性称为不对称转录(asymmetric transcription)，它有两方面含义：在DNA分子双链上，一股链用作模板指引转录，另一股链不转录；其二是模板链并非总是在同一单链上。 6、转录的酶 转录的酶：依赖DNA的RNA聚合酶，RNA聚合酶能直接启动转录：不需要引物。 RNA合成的化学机制与DNA依赖的DNA聚合酶催化DNA合成相似。 DNA聚合酶在启动DNA链延长时需要引物存在，而RNA聚合酶不需要引物就能直接启动RNA链的延长。 RNA聚合酶和DNA的特殊序列——启动子(promoter)结合后，就能启动RNA合成。 第一节 原核生物转录 一、原核生物转录及相关因子 原核生物的转是一个较复杂的过程，除需要RNA酶以外，还需要其它的蛋白质因子参与。 α 36512 决定哪些基因被转录 β 150618 催化功能 βˊ 155613 结合 DNA 模板 σ 70263 辨认起始点 亚 基 分 子 量 功 能 （一） 原核生物RNA聚合酶 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 （二）原核生物转录相关因子 1、ρ因子：控制转录终止； 2、其它因子： 二、原核生物转录过程 转录的基本过程: 起始initiation 延伸elongation 终止termination 1、RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 2、DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。 （一）原核生物RNA转录的起始 转录起始需解决两个问题： 开始转录 T T G A C A A A C T G T -35 区 (Pribnow box) T A T A A T Pu A T A T T A Py -10 区 RNA-pol辨认位点 (recognition site) 1、原核生物RNA聚酶与模板辨认结合 启动子结构 调控序列中的启动子是RNA聚合酶结合模板DNA的部位，也是控制转录的关键部位。原核生物以RNA聚合酶全酶结合到DNA的启动子上而起动转录，其中由σ亚基辨认启动子，其他亚基相互配合。 对启动子的研究，常采用一种巧妙的方法即RNA聚合酶保护法。 启动子的分离——RNA聚合酶保护法 1. 转录起始位点 定义为＋1 2. -10序列： T80 A95 T45 A60 A50 T96 又称为牢固结合位点，在这一区域DNA双链熔解，形成开放复合物 3. -35序列： T82 T84 G78 A65 C54 A45 为RNA聚合酶识别位点。 大肠杆菌启动子：在转录开始位置的上游10个和35个核苷酸