药用酶的生产技术幻灯片.pptVIP

酶的生产方法 提取分离法 (Extraction) 生物合成 (Biosynthesis) 化学合成 (chemicalsynthesis) SOD - blood Papain-Papaya Chymotrypsin-Pancrea …… organ/tissue/cell Amylase from Bacillus Protease from Bacillus Phosphatase from Bacillus Glucoamylase from Aspergillus …… Plant cell culture Animal cell culture Few example 第二节 药用酶的生产技术 一、酶生物合成过程及其调节 二、常见产酶微生物 三、酶的发酵工艺条件及控制 4、酶生产过程的动力学 Go Go Go Go 5、动植物细胞培养产酶，自学 一、 酶的生物合成及其调节 1、中心法则- Central Dogma 2、RNA的生物合成- Transcription 3、蛋白质的生物合成- Translation 4、酶生物合成的调节- Regulation Go Go Go Go 1、中心法则-Central Dogma Replication 复制：亲代DNA或RNA在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 Transcription 转录：以DNA为模板，按照碱基配对原则将其所含的遗传信息传给RNA，形成一条与DNA链互补的RNA的过程。 Translation 翻译：亦叫转译，以mRNA为模板，将mRNA的密码解读成蛋白质的AA顺序的过程。 Reverse translation 逆转录：以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，生成DNA的过程。 2、RNA的生物合成(转录)- Transcription 细胞内RNA的生物功能 (1) 在某些RNA病毒中，其所含的双链RNA作为遗传信息的载体。 (2) 在蛋白质的生物合成过程中，各种RNA起着重要的作用。其中，tRNA作为氨基酸载体，并由其上的反密码子识别mRNA分子上的密码子；mRNA作为蛋白质合成的模板，由其分子上的三联体密码控制蛋白质分子中氨基酸的排列顺序；rRNA与蛋白质一起组成核糖核蛋白体（核糖体），作为蛋白质生物合成的场所。 (3) 某些RNA具有生物催化活性，属于核酸类酶，在一定条件下，可以催化有关的生化反应。 (4) 各种小分子RNA在分子修饰和代谢调节等方面有重要作用。 转录过程的特点 1、转录的不对称性：在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板，称为转录的不对称性。 反义链 antisense strand（无意义链，负链）：在RNA的转录中，用作模板的DNA链称为反义链。 有义链 coding strand（编码链，正链）：在RNA的转录中，不作为模板的DNA链称为有义链。 2、转录所需酶：依赖DNA的RNA聚合酶又称为转录酶，是以DNA为模板的一类RNA聚合酶。在原核生物和真核生物中，转录酶有所不同。原核生物的转录酶比较简单，由1种RNA聚合酶催化所有RNA的生物合成。而在真核生物中RNA聚合酶有3种，分别为RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ和RNA聚合酶Ⅲ，它们都属于寡聚酶，酶的亚基数目为4～10个，亚基种类有4～6种。 转录过程 起始位点的识别 recognition 转录起始 initiation 链的延伸 elongation 转录终止 termination 转录后加工 modification The E. coli RNA polymerase holoenzyme consists of six subunits: a2bb’? s. Possible catalytic subunits Promoter specificity Enzyme assembly, promoter recognition, activator binding Role unknown (not needed in vitro) 36.5 kDa 151 155 11 kDa (32-90 kDa) 3、蛋白质的合成(翻译)-Translation 翻译: 以RNA中mRNA为模板,按照其 核苷酸顺序所组成的密码指 导蛋白质的合成的过程. mRNA 蛋白质 翻译 各种信息 各种蛋白质 （核苷酸排列顺序） （氨基酸排列顺序） 蛋白质合成的几个要素(1)-mRNA(模板) mRNA是带有DNA遗传信息指导蛋白质合成的直接模板。 以mRNA为模板,合成一定结构的多肽链的过程(翻译)，就是将mRNA分子中的核苷酸排列顺序转变成蛋白质分子中的氨基酸排列顺序。