第五章RNA的转录图要点.ppt

第一节：基本概念 第二节：原核生物RNA的转录 第三节：真核生物RNA的转录 第四节：原核生物RNA转录后加工 第五节：真核生物RNA转录后加工 第六节：真核生物转录产物中内含子的去除 第一节 基本概念 转录(transcription) 有义链 (sense strand) 、编码链 （coding strand）、非模板链 反义链 (antisense strand)、模板链 （template strand） RNA的类别 ?信使RNA（messenger RNA，mRNA）：在蛋白质合成中起模板作用； ?核糖体RNA（ribosoal RNA，rRNA）：与蛋白质结合构成核糖体（ribosome），核糖体是蛋白质合成的场所； ?转移RNA（transfer RNA，tRNA）：在蛋白质合成时起着携带活化氨基酸的作用。 RNA合成特征： 前体是ATP、UTP、CTP、GTP 合成方向5’－3’ 一个转录区内，一般只有一条DNA链可以被转录 RNA聚合酶与DNA聚合酶不同 DNA和RNA合成的比较 ＊ 转录的基本过程（P66）： 模板识别、转录起始、转录延伸和终止 真核细胞和原核细胞中模板的识别有什么不同？ 第二节 原核生物RNA的转录(RNA Transcription in prokaryots) 一、RNA聚合酶（全酶、核心酶） 二、启动子 三、转录起始 四、转录延伸 E. coli RNA polymerase（P67） 负责起始和延伸 负责起始 36.5 KD 36.5 KD 151 KD 155 KD 11 KD 70 KD 全酶和启动子的牢固结合（ α 亚基） 未知（ β’亚基） 催化磷酸二酯键形成（ β亚基） 识别启动子，从正确位置启动转录（σ因子作用位点） 由于各亚基的功能，使全酶本身含有五个功能位点 有义DNA链结合位点（ β’亚基提供） DNA/RNA杂交链结合位点（β亚基提供） 双链DNA解链位点（前端 α亚基提供） 单链DNA重旋位点（后端α亚基提供） 识别启动子，从正确位置启动转录（σ因子作用位点） 转录的真实性取决于特异的转录起始位点 （P70） 只有带σ因子的全酶才能专一结合于DNA上的启动子位点 σ因子的作用只是起始转录，一旦转录开始，它就脱离了起始复合物，而由核心酶负责转录延伸 启动子、转录单元、转录起点（P71） RNA聚合酶与启动子区的识别方式：氢键互补（P72） Pribnow框：－10，RNA聚合酶牢固结合位点 Sextama框：－35，RNA聚合酶初始结合位点 依靠σ因子识别该位点 RNApol 在DNA上结合区域的鉴定 DNase 法----------40bp 足迹法（footprinting）结果相对准确+20 ~ －50（－40），大约 60 ~ 70 bp 转录的起始过程 σ 核心酶 12～17bp 第三节 真核生物RNA转录 RNA Transcription in Eukaryots 一、真核生物 RNA pol 二、真核生物启动子 三、转录终止 四、抗转录终止 RNApolⅠ RNApol Ⅱ RNApol Ⅲ 对 α - 鹅膏蕈碱的敏感性 最不敏感 （动、植、昆） 最敏感 不同种类的敏感性不同 位置 核仁 所占比例最大 核质 核质 转录产物 rRNA（5.8S、18S、 28S） hnRNA、snRNA tRNA、5S rRNA、Alu序列，部分 snRNA 一、真核生物的三种RNApol（P69） 二、真核生物启动子区的结构（P75）： -25至-35bp的Hogness区（TATA box） -70至-80bp的CCAAT（CAAT box） -80至-110bp的GCCACACCC/GGGCGCG（GC box） 上游启动子元件UPE 下降突变、上升突变 （P75） 增强子（enhancer） TATA区控制转录精确起始 CAAT区和GC区控制转录起始频率 原核生物和真核生物mRNA比较（P78） 原核生物mRNA半衰期短 原核生物——多顺反子；真核生物——单顺反子 原核生物mRNA无5’端帽子结构，3’端没有或只有很短的poly(A)尾；真核生物mRNA有5’端鸟苷帽（鸟苷酸转移酶），绝大多数真核生物3’端有poly(A)尾【 poly(A) 合成酶】 帽子结构使mRNA免遭核酸酶破坏； poly(A)尾是mRNA由细胞核进入细胞质所必需形式 mRN