第五章杀虫剂的代谢要点.pptVIP

第五章：杀虫剂在昆虫体内的代谢 1.杀虫剂的初级代谢 2.杀虫剂的次级代谢 3.一些杀虫剂在昆虫体内的代谢 昆虫对杀虫剂代谢的结果： 解毒作用 活化作用 昆虫对杀虫剂的代谢类型： 次级产物 初级产物 次级产物 第一节　杀虫剂的初级代谢 一　杀虫剂的氧化代谢 杀虫剂代谢中所涉及到的酶系很多，主要酶系有：脱氯化氢酶（deyudrochlorinase）、微粒体多功能氧化酶（microsomal mixed-function oxidases）、谷胱甘肽转移酶（glutathionetransferases）、各种酯酶（esterases）等。由于微粒体多功能氧化酶具有底物的极大的广谱性，他们能参与各种杀虫剂（包括有机氯、有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯、化学不育剂和昆虫生长调节剂等）的解毒作用，以及催化生物变化也很广泛的特点，所以微粒体多功能氧化酶在杀虫剂的代谢中起着中心作用。 一　杀虫剂的氧化代谢 多功能氧化酶的研究历史 MFO的组成及作用机制 细胞色素P450的特性 细胞色素P450的作用机理 MFO对外来化合物的反应类型 MFO的抑制剂 外来化合物对MFO的诱导作用 影响MFO活性的一些因子 1. 1943年Claude把不同离心作用所分离出来的亚细胞颗粒（直径约200nm），称之为微粒体。 2. 1958年，Brodie证明了离体微粒体氧化酶需要氧和还原性辅酶Ⅱ（NADPH）。 3. 昆虫中的微粒体氧化酶是1961年首次在德国蜚蠊中发现的。 1.多功能氧化酶的研究历史 MFO的分离－差速离心 2.MFO的组成及作用机制 包括： 细胞色素P450（血红素蛋白） NADPH-细胞色素P450还原酶（黄素蛋白） NADH-细胞色素b5还原酶 磷脂 铁硫蛋白 3.细胞色素P450的特性 1）光学特性 　　　微粒体被还原后可以与CO结合形成复合体，通过双光束扫描分光光度计扫描，在波长450nm处出现一个最大吸收峰。 除了与CO结合外，细胞色素P450可以与许多物质结合，结合后所诱导产生的光谱，按其性质分为三类： Ⅰ型：波峰在390-410，波谷在425-435nm； Ⅱ型：波峰在425-435nm，波谷在390-410nm； III型：最大和最小吸收峰分别在325和420nm。 棉铃虫中肠细胞色素P450 CO 差光谱图 2)不稳定性 3)多样性 控制P450的基因是基因超家族，目前P450基因超家族包括70个家族，120个亚家族（Nelson,1998），且数量增长很快。 4) 可诱导性 现已证明，许多化合物，如药物、杀虫剂、以及植物他感化和物都能诱导P450的生物合成。目前研究比较清楚的是苯巴比妥和3-甲基胆蒽对P450的诱导合成。 细胞色素P450酶系的作用机理 1.）底物与酶结合，酶上的铁原子由于NADPH-细胞色素P450还原酶供给一个电子使得三价铁还原为二价铁。 2.）铁的还原作用使其与分子氧结合。 3.）另一个电子和质子加到铁上形成FeOOH复合体。 4.）失去一分子水后形成（FeO）3+复合体，此复合体将其氧原子转移到底物上。 5.）被氧化的底物释放出来，游离的细胞色素P450又重复下一个循环。 4.细胞色素P450酶系的作用机理 Fe3+ P450 底物 OH FeOOH P450 底物 H Fe2+ O2 P450 底物 H Fe2+ P450 底物 H e- O2 Fe3+ P450 底物 H Fe3+ P450 底物 OH 底物 H e- (FeO)3+ P450 底物 H H+ H2O H+ 1 5. MFO对外来化合物的反应类型 O、S和N-烷基的羟基化作用 脂族羟基化作用和环氧化作用 芳香族羟基化作用 有机磷酸酯的脂族氧化作用 氮和硫醚的氧化作用 1. 脱硫氧化和酯键断裂 对硫磷 中间体 对氧磷 二乙基磷酸 对硝基苯酚 ＋ 2.环氧化和芳基羟基化 环氧化物 水解酶 苯并芘 　　　 9,10-苯并芘二醇 艾氏剂 　　 狄氏剂 3.脂肪族羟基化 对硝基甲苯 对硝基苯甲醇 DDT 　　　　 三氯杀螨醇 4. ? 杂环羟基化 烟碱　　　　　　　5-羟基烟碱　 　　　cotinine 5.　N,O,S-脱烷基化 N-甲基对氯苯胺 对氯苯胺 对硝基苯甲醚 对硝基酚 可根据对硝基酚在412nm的光吸收测定MFO的活性 在昆虫的离体研究中还没有发现S-脱烷基化作用 6.硫氧化(亚砜，砜) 涕灭威