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检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质
专题一 细胞的分子组成
课题四 检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质
【考点导航】
1.检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质A
【实验案例】
1.检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质
实验原理:还原糖
脂肪
蛋白质
方法步骤:
①可溶性还原糖的鉴定
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
1. 制备组织样液。
(去皮、切块、研磨、过滤)
苹果或梨组织液必须临时制备。
色浅、含量高
因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
2. 取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。
3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;
甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu(OH)2生成。
4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色 → 棕色 → 砖红色(沉淀)
最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。
也可用酒精灯对试管直接加热。
防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;
缩短实验时间。
②脂肪的鉴定
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。
干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。
因为浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。
在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。
染色时间不宜过长。
用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。
用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
装片不宜久放。
时间一长,油滴会溶解在乙醇中。
③蛋白质的鉴定
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
制备组织样液。
(浸泡、去皮研磨、过滤。)
黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。
鉴定。加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。
A液和B液也要分开配制,储存。鉴定时先加A液后加B液。
CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。
否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
可用蛋清代替豆浆。
蛋清要先稀释。
如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。
附:淀粉的检测和观察
用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。
碘液不要滴太多
以免影响颜色观察
【巩固练习】
1.下面是四位同学的实验操作方法或结果,其中错误的一项是 ( )
A.番茄汁中也含有丰富的葡萄糖和果糖,可用作还原糖鉴定的替代材料
B.用纸层析法分离叶绿体中的色素,扩散最快的一条色素带呈橙黄色
C.蛋白质与双缩脲试剂作用产生紫色反应
D.显微镜下观察根尖的有丝分裂,在细胞呈现正方形的区域易找到分裂期的细胞
2.不同的有机物与某些物质反应有特殊的显色反应,实验中常以此来鉴定不同的有机物。肾小球肾炎病人常伴随水肿,其尿液( )
A.与二苯胺反应呈蓝色 B.与斐林试剂反应呈砖红色
C.与苏丹Ⅲ反应呈橘黄色 D.与双缩脲试剂反应呈紫色
3.下列关于实验的描述中正确的一组是 ( )
①斐林试剂加入到蔗糖溶液中,加热后出现砖红色沉淀 ②脂肪的鉴定需用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 ③鉴定还原糖时,要先加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液 ④蛋白质用双缩脲试剂鉴定呈紫色 ⑤洋葱根尖装片制作的步骤是解离、漂洗、染色、制片 ⑥观察洋葱根尖装片发现最多的细胞是前期细胞 ⑦观察黑藻细胞质流动的标志物是叶绿体 ⑧观察黑藻
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