水孔蛋白.docVIP

1 水孔蛋白的发现 人们首次在脊椎动物中发现了水孔蛋白。1 987年，Agre等分离了红细胞Rh血型抗原中跨双分子层的多肽成分，在用考马斯亮蓝染色时，有一种28 kD的多脯着色很少。起初他们认为这种多肽是Rh细胞的蛋白水解片段 随后，Denker等 ”对这种多肽进行了生物化学鉴定，最初的研究表明这种蛋白质由疏水性氨基酸组成，并以两种形式存在：28 kD的未糖基化的多肽和40～ 60 kD的N一糖基化的多肽。后来人们把这种独特的多脯命名为水孔蛋白口。 早在2O世纪60年代初，Ray：” 和Dainty[ 就发现在植物膜中可能存在水通道。后来在植物中分离了许多水孔蛋白。 2 水孔蛋白的结构 晶体学和拓扑学的研究表明，水孔蛋白具有MIP家族典型的结构特征， 由5个短环连接的6个亲水的跨膜螺旋及N端和C端组成。其N端和C端及B、D环面向细胞质一侧。水孔蛋白在跨膜区及B、E环的氨基酸序列相对保守，而N端和C端的变化相对较大。B、E环各自含有一段高度保守的氨基酸序列Asn—Pro．Ala，称为NPA盒，它们直接参与了水通道的形成；同时B环和E环各自形成半个跨膜螺旋(HB、HE)，参与水孔蛋白活性的调控(Chaumont等2005)。E环NPA盒前的半胱氨酸是水孔蛋白的汞抑制部位； 汞离子和有机汞可以通过与半胱氨酸结合而封闭水通道。虽然研究表明水孔蛋白单体即有水通道的活性， 但在活体生物膜上通常以四聚体的形式存在， 组成水漏状结构(侯彩霞等1997；于秋菊等2002)。也有少数以二聚体或单体形式存在(朱美君等2000)。水孔蛋白的活性受PH值、Ca2+、重金属离子(HgC12、AgNO3和HAuC14)、磷酸化、多聚化和异源蛋白间相互作用等影响(Niemietz和Tyerman2002；Fetter等2004；Kaldenhof和Fischer 2006；Hedfalk等2006)。生长激素(脱落酸、赤霉素、油菜内酯)、蓝光、盐分、干旱及病原微生物的侵染也均能诱导水孔蛋白基因的表达。 3 植物水孔蛋白的功能 3．1 介导水分的快速跨膜转运 植物许多生理过程的发生需要大量的水分子快速进出细胞， 如种子萌发、根及下胚轴的伸长以及韧皮部的物质转运(Eisenbarth和Weig 2005；Fraysse等2005)。水孔蛋白基因的表达通常与上述生理过程具有同步性，并具有组织特异性。在种子成熟的晚期， 拟南芥 —TIP在蛋白贮藏囊泡上特异性表达：在种子萌发及幼苗初期，伴随蛋白贮藏囊泡内物质的分解和吸收， —TIP逐渐消失，而*／-TIP积累增多(于秋菊等2002)。P ⅣJP． 在豌豆(Pisumsativum)种子的种皮中特异性表达；P P J 在干种子中高效表达， 可能与P 2 共同参与种子吸水萌发过程(Schuurmans等2003)。蓖麻(Ricinus communis)RcPIP2；1参与幼苗下胚轴的伸长生长(Eisenbarth和Weig 2005)。拟南芥A删 2在根中优势表达， 其突变体根部皮层的导水力(hydraulic conductivity)下降25％-30％ (Javot等2003)。抑制烟草质膜NtAQPI的表达，导致根细胞的导水力下降55％ (Siefritz等2002)。珊瑚轮藻(Chara corallina)节间水通道的关闭可导致细胞导水力降低75％ (Henzler和Steudle 20001吴安慧等2006)。在番茄(Lycopersicon esculentum)果实发育和种子形成的过程中，7个LePIPI和LePIP2；2在早期表达量上升， 后期则逐步下降(Shiota等2006)。棉花(Gossypium hirsutum)GhAQP1在胚珠中特异性表达，开花后9 d表达量达到最高，随后逐渐下降；胚珠发育到20~30 d时，GhAQP1表达活性丧失(李登第等2006)。棉花开花后8～15 d是胚珠发育最为迅速的阶段，这表明GhAQPI的表达模式与胚珠的发育相协调， 对促进胚珠细胞的迅速分裂和膨大有意义。 3．2 参与气孔运动 拟南芥AthH2基因在气孔保卫细胞中高效表达； 向日葵(Helianthus annuus)SunTIP7和SunTIP~O在保卫细胞中表达，前者在气孔关闭时表达上调， 后者表达量保持不变(Sarda等1997)。蚕豆(Vicia faba)BBAQ1在蚕豆保卫细胞中专一表达，而在其他表皮细胞中几乎没有表达(Sun等2001)。菠菜(Spinacia oleracea)SoPIP1：1定位于保卫细胞上(Fraysse等2005)。上述研究表明水孔蛋白参与气孔的运动。保卫细胞膜上的水孔蛋白可能作为渗透压感受器， 而与某些离子通道(如K 、C1一)相耦联(MacRo