肠道致病菌.doc

肠道杆菌（enteric bacilli） 是一大群寄居在人和动物肠道中生物学形状近似的G－杆菌。如：大肠杆菌，肠道致病菌（伤寒杆菌、痢疾杆菌、变形杆菌等） （一）SS平板 一种强选择性培养基。主要成分为营养物质、抑菌物质、促进待检菌生长的物质及指示剂（指示剂为中性红：酸红，碱黄）等。乳糖被非致病菌分解产酸，蛋白胨被致病菌分解产碱。大肠杆菌形成分解乳糖，呈红色菌落。而肠道致病菌不分解乳糖，菌落呈透明微黄色。 乳糖发酵试验：大肠杆菌菌落大，分解乳糖——“大红” 肠道致病菌菌落小，不分解乳糖——“小白” （二）双糖铁培养基 用于观察细菌是否产生硫化氢及对糖的发酵能力，初步鉴别细菌。此培养基上层含乳糖、酚红、硫酸亚铁，固体斜面；下层含葡萄糖、酚红，半固体（可以观察细菌是否运动——是否有鞭毛）。大肠杆菌能发酵乳糖和葡萄糖产酸产气，使斜面与底层均呈黄色并有气泡。而肠道致病菌一般只发酵葡萄糖不发酵乳糖，故底层为黄色；上层因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖会生成碱性化合物，使斜面部分变为红色。（指示剂为酚红） 葡萄糖 乳糖 麦芽糖 甘 蔗糖 H2S 尿素 靛基质 大肠杆菌 ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ - - - + 痢疾杆菌 + - - + - - - - 伤寒杆菌 ⊕ - + + + -/+ - - 变形杆菌 ⊕ - - - - + + - （三）糖发酵试验 酸性复红为指示剂，若能分解糖，则变红。内置一小试管，以便收集气体。 （四）靛基质（吲哚）生成试验 具有色氨酸酶的细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸形成靛基质，试剂中的对二甲基氨基苯甲醛（油性，浮于液面）与靛基质结合形成玫瑰色靛基质，容易识别。 将试验菌接种在蛋白胨水肿，37℃温箱培养24h后取出，加入柯氏试剂2~3滴，震荡后两者接触面呈玫瑰色为阳性，黄色为阴性。 （五）尿素分解试验 又有尿素酶的细菌能够分解尿素产生氨，使培养基pH上升，酚红指示剂变为红色。 将试验菌接种到尿素固体培养基上，37℃温箱培养18~24h，培养基呈红色为阳性。 霍乱弧菌 G-；菌体呈弧形或逗点状（一个弯曲）；一端有单鞭毛，有些菌株有荚膜。根据O（耐热）抗原不同，可将其分为139个血清群，O1和O139群能引起霍乱流行。 厌氧芽胞梭菌是一类在有氧环境下生长不良而在厌氧条件下生长良好的有芽胞细菌。 厌氧菌一般在含有10%H2、10%CO2、80%N2条件下可以生长。常用培养厌氧菌的方法有厌氧罐、箱；气袋法等；也可用庖肉培养基培养。 破伤风梭菌（庖肉培养基），G+，芽胞位于菌体顶端，大于菌体使细菌呈鼓槌状，菌体细长，有周身鞭毛，外毒素致病。对人致死量1ug。 血平板上菌落呈羽毛状。 疱肉培养基呈灰色 产气荚膜梭菌，两端钝圆的G＋粗大杆菌，单独或成双排列，在体内有明显的荚膜。无鞭毛。环境优良时形成荚膜，环境恶劣的时候形成芽孢，位于次极端。 （1）疱肉培养基呈粉色，有大量气体 （2）高层琼脂断裂— 产气荚膜梭菌产生的大量气体将固体琼脂冲断，成多段。 （3）汹涌发酵—产气荚膜梭菌能分解牛乳中的乳糖，产酸使酪蛋白凝固，并能产生大量气体（H2和CO2）将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状；并将封口蜡（凡士林）冲至试管上部，气势汹涌。 （4）靶样溶血—血琼脂平板上，有双层溶血环。 内环完全溶血— θ毒素 外环不完全溶血— α毒素 肉毒梭菌 G+ 粗大杆菌，次极端芽胞，芽胞卵圆形大于菌体，使细菌呈汤匙状或网球拍状。周身鞭毛，无荚膜。肉毒毒素是目前已知毒物中毒性最强者，对人的致死量0.1μg，肉毒毒素作用于外周胆碱能神经，抑制神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹。 伤寒杆菌 实验中伤寒、甲乙副伤寒杆菌被稀释了40,80,160,320,640倍。 初次发病血清IgM，即O抗体，出现早，维持时间短。 恢复后血清IgG，即H抗体，出现晚，维持时间长。 伤寒沙门菌O 1：80，H 1：160；副伤寒沙门菌：H： 1：80；动态观察： 恢复后血清抗体是初次发病的 4倍 H、O抗体 高 感染可能性大 H、O抗体 不高 感染可能性小 O高，H不高 感染早期/交叉反应 O不高，H高 感染晚期/预防接种/特异性回忆反应 下层发酵、上层不发酵 （可疑肠道致病菌） 生化反应 上、下层均发酵 （大肠杆菌） 双糖铁培养基 粪便或肛拭子 SS培养基等分离培养 血清学鉴定