基因工程-2要点.ppt

基因工程技术 曹月青 重庆大学生命科学学院 第三章 基因工程的常用载体 主要内容 载体的功能及特征 质粒（plasmid） λ噬菌体 M13噬菌体 考斯质粒（cosmid）与噬菌粒 人造染色体载体 作用一：作为运载工具，将外源基因转移 到受体细胞中去。 作用二：为外源基因提供复制能力或整合 能力 作用三：为外源基因的扩增或表达提供必 要的条件 （一）载体的作用 作为运载体必须具备哪些条件？ 1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2）高效率的进入宿主细胞 3）具多个单一限制酶切点，以便与外源基因连接。 4）具有较高的外源DNA的载装能力。 5）具有某些标记基因，便于进行筛选。 6）容易从宿主细胞分离出来，便于后续体外操作 质粒是细菌或细胞染色体外，小型共价闭合环状双链DNA (cccDNA)分子，是能够独立复制并保持恒定遗传的复制子。与宿主共存的遗传单位。 （二）质 粒 1、质粒的定义 细胞内独立的能够自我增殖的结构单位为复制子； 包括与复制控制有关的结构和与复制控制无关的 结构； 细菌的染色体是一个复制子，而真核生物染色体是 多个复制子的复合体。 可自然形成超螺旋，大小在2-300kb。还有开环（ocDNA）和线