菊花组织培养要点.ppt

学习目标： 掌握植物细胞的全能性，明确植物细胞体现全能性的条件。 了解植物组织培养技术在生产中的应用。 熟悉植物组织培养的基本过程。 了解影响植物组织培养的各种因素。 掌握植物组织培养的基本技术。 （一）植物组织培养概念 （三）植物组织培养的理论基础---细胞全能性 概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。 基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。 表达条件：离体条件 无菌操作 适宜物质的诱导和调节（植物激素） 适宜的营养物质 温度、酸碱度、光照等条件的控制 三、影响植物组织培养的因素 1、材料的种类、年龄及保存时间长短等 2、营养 3、植物激素 4、PH、温度、光照等条件 3、植物激素的影响 常用植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势 激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向 供参考的配方 1、诱导菊花愈伤组织： 在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度均为0.5mg／Ｌ ２、诱导菊花从芽： 在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度分别为2---3mg／Ｌ和0.02—0.03mg／Ｌ 3、诱导菊花生根： 在MS培养基各成分用量减半，并添加入NAA或IAA，质量浓度均为0.1mg／Ｌ 4．温度、光照、pH的影响 在植物组织培养的过程中， 为什么要进行一系列的消毒、灭菌， 并且要求无菌操作？ 1、接种前用体积分数70%酒精擦拭工作台，点燃酒精灯，所有操作在酒精灯旁边进行，每次使用器械后都要灼烧灭菌 2、将装有培养基的锥形瓶整齐的排列在酒精灯左侧，将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成小段（0.5-1cm） 3、左手持锥形瓶，右手拉开捆扎锥形瓶的绳子，并将封口膜攥于右手手心，以避免封口膜接触瓶口的一面被污染。左手持瓶，使瓶口旋转通过火焰。 4、右手用镊子夹取菊花茎段，插入培养基中，不要倒插，每瓶6-8块外植体，接种后，将封口膜重新扎好。 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒 培养温度控制在18-22℃ 每日用日光灯光照12h 结果分析与评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格 练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。 2．菊花的花粉经组织培养可发育成一株幼苗， 这一过程不涉及下列哪一项（ ） A．有丝分裂、细胞分化、组织器官的形成 B．呼吸作用、光合作用、相关激素的调控 C．DNA的复制、转录、蛋白质的生物合成 D．等位基因的分离、非等位基因的自由组合 3．某花卉感染了植物病毒，叶子呈现疱状，欲培养出无病毒的后代，应采取的方法是（ ） A．用种子培养后代 B．用无明显症状部分的枝扦插 C．用茎尖进行组织培养诱导出植株 D．用叶表皮细胞进行组织培养，诱导出植株 4．下列关于影响植物组织培养的因素的叙述 不正确的是（ ） A．幼嫩组织较成熟组织易培养成功 B．给外植体消毒用70%的酒精 C．接种花药后一段时间内不需要光照， 但幼小植株形成后需要光照 D．生长素与细胞分裂素含量之比较高时 有利于芽的分化 5．乙醇等“绿色能源”的开发备受关注，利用玉米秸秆等生产燃料酒精已成大势所趋。植物组织培养可实现玉米等的大规模快速繁殖，图解如上，由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植株， 这项技术利用了 原理， 通过组织培养技术进行植物繁育， 可以很好地保持亲本的优良性状， 原因是 A、B分别代表 和 ， 过程①、②分别表示 和 。 光照：菊花每日用日光灯照射12h。 温度： 大多数植物组织培养控制在23～27℃，低