王航宁毕业答辩要点.pptVIP

单环刺螠（Urechis unicinctus）vasa基因的发育表达图式及生殖腺的发生和发育 答辩人：王航宁 导 师：张志峰 教授 单环刺螠Urechis unicinctus 螠虫动物门（Echiura） 无管螠目（Xenopneusta） 刺螠科（Urechidae） 刺螠属（Urechis） 生殖腺类型 生殖腺发生、发育 实验内容 实验材料、方法 实验材料：单环刺螠胚胎、幼虫 实验方法：使用本实验室前期获得的vasa基因序列，合成Uu-vasa mRNA探针，通过原位杂交技术检测Uu-vasa在胚胎、幼虫中的表达。 小 结 1、Uu-vasa mRNA在从未受精卵至囊胚期均匀表达。 2、Uu-vasa mRNA从原肠胚时期开始集中表达。 实验方法 1、实验材料：3-4 cm 幼螠，单环刺螠 成体。 2、实验方法：幼螠连续组织切片；单环 刺螠成体性腺组织切片。 单环刺螠性腺组织学结构 小 结 1、最早在3.5 cm幼螠的尾部呼吸肠外壁处观察到生 殖腺原基，它是由PGCs和呼吸肠外壁生成的结 缔组织形成了生殖原基。 2. 单环刺螠性腺位置固定，不具排出管，属于低等向高等进化的过渡类型。与星虫相比较，更为低等。 实验内容 实验材料、方法 1、实验材料：发育周期中的单环刺螠雌雄成体。 单环刺螠雌性体腔提取液。 2、实验方法：组织切片方法观察单环刺螠性 腺年周期发育。 电镜观察卵膜发生过程。 单环刺螠精巢年发育周期的组织学观察 卵巢年发育周期的组织学观察 小 结 1.单环刺螠性腺发育分为5个时期。 2.性腺发育及生殖细胞发生方式属于低等向高等进化的过渡类型。与星虫动物、环节动物相似，这三类动物在生殖系统上有一定的亲缘性。环节—螠虫—星虫 3.初级卵膜卵膜的发生，可能与卵母细胞中的黏液泡胞吐过程有关。 总 结 1、整体原位杂交实验分析了Uu-vasa mRNA在不同胚胎、幼虫时期的发育表达图式。 2、通过连续切片实验，首次在3.5cm幼螠中，发现性腺原基；4cm幼螠中，性腺的基本结构组成已具备 。 3、通过组织学切片，观察到单环刺螠成体性腺位置固定，不具排出管，属于低等向高等进化的过渡类型。 总 结 4、通过组织学观察，将性腺年发育周期划分为 生长期、增殖期、成熟期、排放期和休止期5 个时期。 5、初级卵膜的形成，与早期卵母细胞内黏液泡 胞吐现象有关。 展 望 Uu-vasa基因的发育表达图式： 致 谢 感谢我的导师三年来对我的亲切关怀和悉心指导，导师渊博的学识、一丝不苟的治学态度和忘我的敬业精神将使我终身受益。 感谢邵明瑜老师对我的实验的指导和帮助。 感谢实验室全体同学给予本论文的积极建议和无私帮助。 国家自然基金面上项目资助（No. *Company Logo * 中国海洋大学硕士学位论文 研究背景 实验内容 总结、展望 1 2 3 经济食用价值 药用价值 独特的分类学地位 耐硫 立题依据 性腺发生和发育 生殖相关研究 生活史 体腔液 生殖细胞 生殖 调控 进化 地位 种质 改良 生殖腺？ 立题依据 卵巢 精巢 卵精巢/精卵巢 不具排出管 无肠类，腔肠动物等 具排出管 软体动物等较高等的动物 不具排出管 无肠类，腔肠动物等 本身具有内腔和排出管 纽虫，海胆等 雌雄同体动物，如海鞘 无固定位置、形态 有固定位置、形态 生殖腺 生殖细胞 分泌性激素 种群繁衍 调节发育 研究背景 研究背景 生殖腺 生殖细胞 体细胞 PGCs 生殖嵴 成熟 发育周期 鉴定方法：vasa 原生殖细胞形成 “先成论”－生殖质 “后成论”－诱导信号 线虫、头足、毛颚、昆虫及大部分脊椎动物 腔肠、棘皮和哺乳类动物 编码DEAD-box家族成员中一种ATP依赖的RNA解旋酶。 最先在果蝇(1986)中发现, 它作为一种母源效应基因在果蝇腹部形成及生殖细胞分化中起重要作用。 普遍认为可作为原生殖细胞的分子标记物 。 vasa 单环刺螠Uu-vasa基因的发育表达图式 单环刺螠性腺的发生及其组织结构特征 单环刺螠性腺发育周期的组织学观察以及卵膜的形成 单环刺螠Uu-vasa基因的发育表达图式 受精卵 未受精卵 4细胞 2细胞 囊胚期阴性对照 囊胚期 Uu-vasa mRNA在胚胎中的表达图式 原肠胚 担轮幼虫 体节幼虫 蠕虫幼头部腹面观 蠕虫幼头部侧面观 蠕虫幼尾部侧面观 单环刺螠Uu-vasa基因的发育表