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发酵控制II研讨
发酵控制II CO2对发酵的影响 CO2是呼吸和分解代谢的终产物,几乎所有发酵都产生大量CO2。 同时, CO2也可以作为基质,某些无机化能营养菌能以CO2作为唯一碳源利用。 大多数微生物适应低浓度CO2, CO2浓度高时会强烈抑制微生物生长和产物合成,影响菌体形态 CO2作用膜脂质核心部位, HCO3- 影响细胞膜的膜蛋白,磷脂,亲水头部带电荷,改变膜流动性及表面电荷密度,影响膜运输效率,导致细胞生长受限制,形态改变 也可产生反馈作用,使PH下降,与其他物质反应,与生长必需金属离子形成碳酸盐沉淀,过分耗氧,引起溶解氧下降等,影响菌体生长和产物合成。 发酵液中CO2浓度的影响因素: 细胞呼吸强度; 发酵液流变学特性; 通气搅拌程度; 罐压大小; 设备规模。 二氧化碳浓度的控制方法: 调节罐压、通气量和搅拌速度; 补料。(青霉素:补糖,增加CO2 产生,降低PH。) 加糖,补料对发酵的影响 分批发酵常因配方中的糖量过多造成细胞生长过旺,供氧不足.解决这个问题可在发酵过程中加糖和补料.补料的作用是及时供给菌合成产物的需要.通过补料控制可解除基质过浓的抑制,产物的反馈抑制以及G分解代谢物的抑制.从而调节菌体生长。 补料的策略:一次性大量:操作简便,但会造成发酵液瞬时大量稀释,扰乱菌的生理代谢,难于将过程控制在最适合于生产的状态; 多次少量:麻烦些,但更合理; 连续流加:恒速, 变速流加. 流加操作控制系统又分为有反馈控制和无反馈控制两类 必须选择恰当的反馈控制参数,以及了解这些参数对微生物代谢、菌体生长、基质利用以及产物形成之间的关系。 采用最优的补料程序也是依赖于比生长曲线、形态、产物形成速率及发酵的初始条件等情况。 补料的原则: 控制微生物的中间代谢,使之向着有利于产物积累的方向发展. 补料应注意的问题1,料液配比要适当2,加强无菌观念3,经济核算,节约成本 泡沫的对发酵的影响与控制 泡沫形成的原因 一. 气液接触 (1)气体从外部进入液体,如搅拌液体时混入气体 (2)气体从液体内部产生。气体从液体内部产生时,形成的泡沫一般气泡较小、较稳定。 二. 含助泡剂 纯溶剂不起泡,如蒸馏水,只有摇荡某种溶液才会起泡。 在纯净的气体、纯净的液体之外,必须存在第三种物质,才能产生气泡。对纯净液体来说,这第三种物质是助泡剂。 助泡剂会形成定向吸附层。与液体亲和性弱的一端朝着气泡内部,与液体亲和性强的一端伸向液相,这样的定向吸附层起到稳定泡沫的作用。 三. 起泡速度高于破泡速度 高起泡的液体,产生的泡沫不一定稳定。体系的起泡程度是起泡难易和泡沫稳定性两个因素的综合效果。 泡沫产生速度小于泡沫破灭速度,则泡沫不断减少,最终呈不起泡状态;泡沫产生速度等于泡沫破灭速度,则泡沫数量将维持在某一平衡状态;泡沫产生速度高于泡沫破灭速度,泡沫量将不断增加。 发酵过程产生的泡沫 (1)通气搅拌的强烈程度 通气大、搅拌强烈可使泡沫增多,因此在发酵前期由于培养基营养成分消耗少,培养基成分丰富,易起泡。应先开小通气量,再逐步加大。搅拌转速也如此。 (2)培养基配比与原料组成 培养基营养丰富,黏度大,产生泡沫多而持久,前期难开搅拌。 例:在50L罐中投料10L,成分为淀粉水解糖、豆饼水解液、玉米浆等,搅拌900 rpm,通气,泡沫生成量为培养基的2倍。如培养基适当稀一些,接种量大一些,生长速度快些,前期就容易开搅拌。 (3)菌种、种子质量和接种量 菌种质量好,生长速度快,可溶性氮源较快被利用,泡沫产生几率也就少。菌种生长慢的可以加大接种量 (4)灭菌质量 培养基灭菌质量不好,糖氮被破坏,抑制微生物生长,使种子菌丝自溶,产生大量泡沫,加消泡剂也无效。 如果泡沫异常增多,也有可能是污染杂菌 机械消泡 优点:节省原料、减少了染菌机会 缺点:不能从根本上消除引起气泡的原因,不如化学消泡迅速可靠,需设备,耗能。 机械消泡装置的选择依据:动力小、结构简单、坚固耐用、清洁(杀菌)容易、维修(保养)费用少 机械消泡方法 罐内消泡:在发酵罐内消除泡沫 耙式消泡桨、碟式消泡器等 罐外消泡:将泡沫引出发酵罐外,消泡后再返回罐内 旋转叶片消泡器、离心式消泡器等 通过喷头将含气泡的培养液喷向转向板,使其破裂,然后再流回发酵罐。 消泡剂消泡 化学消泡法 机理:由于消泡剂本身的表面张力较低,当其与气泡膜表面接触时,使气泡膜局部的表面张力降低,从而使气泡破裂。 消泡剂应有的特点:是表面活性剂,具有一定的亲水性,溶解度较小、无毒,不影
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