实验-血清氯测定研讨.pptVIP

Cl是血清主要的阴离子,具有平衡血清电荷,维持血浆渗透压的生理功能 原理 : 2Cl- + Hg(SCN)2 → HgCl2 + 2(SCN)- 3(SCN)- + Fe3+ → Fe(SCN)3 (橙红色) 橙红色的 Fe(SCN)3 吸收峰在460nm 精密度评价 重复性试验 将同一材料分成数份实验样本，进行多次分析测定 目的：评价或验证试验方法的 随机误差或不精密度 与时间相关的不精密度：批内、批间、日间 批内重复性试验 批内重复性试验是同一份试验材料分成数份,在短时间内多次分析测定 ——由于是短时间测定,而短时间内变异条件的概率很小,所以它过低估计了精密度 一般样本取高中低三个水平，每个水平样本进行20次重复测量 批间重复性试验 批间重复性试验是同一份试验材料分成数份,一天内做数组，每组数次测定 ——这种变异性通常比观察到的批内重复的变异要高 一般样本分成20份，5组，在一天内分批进行测定 日间重复性试验 日间重复性试验是将试验材料分成数份(20)每天测定一份，连续测定数天(20) ——这种变异通常是最大的，也最实际。因为它包含了不同实验人员，仪器日间变化，不同移液器的使用以及实验室的温度、湿度、水质或其他条件变化而导致的方法性能的改变 不精密度评价 实验操作 测定结果记录 离群值剔除 小样本的离群值，可以用Grubbs检验 G=|Xd-X| / s 临床意义 增高 代酸、高钠血症、 低渗性脱水、过 量补充生理盐水 减低 代碱、氯化钠异常丢失（呕吐、腹 泻）或摄入减少 脑脊液 脑脊液氯含量高于血清，重症结核 性脑膜炎时，氯化物含量降低，化 脓性脑膜炎时偶见，普通脊髓灰质 炎与病毒性脑膜炎时基本正常。重 型中枢系统感染，抗利尿激素减少 →低氯 PPT DESIGN PPT DESIGN 血清氯测定(重复性试验) 龚小伟 张科 可以放公司标志 同位素稀释 质谱法 1 硫氰酸汞 比色法 3 库仑电量 分析法 4 离子选择 电极法 5 Cl 测定方法 硝酸汞 滴定法 2 酶法 6 硫氰酸汞比色法测定血清氯化物 注意： 1.卤素离子干扰 2.呈色强度与硫氰酸汞和硝酸汞含量相关 3.温度相关性 吸光度会随温度升高而增高,故测量时要用标 准管,而不宜使用剂量反应曲线 4.线形范围 75-125mmol/L 批内不精密度的判断限是1/4允许误差范围，批间不精密度的判断限是1/3允许误差范围。 允许误差范围可以根据CLIA’88规定的能力比对试验确定 可以放公司标志 血清氯化物测定重复试验（批内） 目的: 1.掌握硫氰酸汞比色法测定血清氯化物的原理 2.掌握重复性试验的原理，用途，以及批内重 复性、批间重复性、日间重复性试验的区别 3.熟悉氯化物测定的临床意义，以及批内重复 性的具体操作 4.了解硫氰酸汞比色法测定的注意事项 加入物（ml） 试剂空白管 标准管 测定管 试剂 2.0 2.0 2.0 蒸馏水 0.01 - - 氯标准液 - 0.01 - 血清 - - 0.01 混匀，置室温10min，试剂空白管调零，在480nm波长处比色，分别读取各管吸光度，记录 1 2 3 …… 测定管吸光度A1 标准管吸光度As 6 5 4 计算 氯化物（mmol/L）= 查G值表，若G值大于对应的Ga,n , Xd则为离群值 若只有一个离群值,直接舍弃; 若离群值大于两个,则在舍弃G值较大的离群值后,相应的 n 应 该减少,并且置信水平要提高; 由于本实验 n 很小所以当离群值较多时,说明检测的不精密度 高,应该检查检测系统是否存在问题,待查出问题并解 决后,重新进行测定 PPT DESIGN PPT DESIGN