3第三章遗传物质的分子基础程序.ppt

RNA链的合成与DNA链的合成同样，也是从5’向3’端进行的，此过程由RNA聚合酶(RNA polymerase)催化。 RNA聚合酶首先在启动子部位(promoter)与DNA结合，形成转录泡(transcription bubble)，并开始转录。 在原核生物中只有一种RNA聚合酶完成所有RNA的转录，而在真核生物中，有三种不同的RNA聚合酶控制不同类型RNA的合成。 RNA的合成也同样遵循碱基配对的规则，只是U代替了T。 三、原核生物RNA的合成 通常把转录后形成一个RNA分子的一段DNA序列称为一个转录单位(transcript unit)。 一个转录单位可能刚好是一个基因，也可能含有多个基因。 RNA的转录可以分为三步(图3－24)： (1)RNA链的起始； (2)RNA链的延长； (3)RNA链的终止及新链的释放。 在讨论有关RNA转录时通常要用到上游(upstream)和下游(downstream)二个概念。因为RNA的转录总是从5’向3’端进行，所以上游总是指RNA分子的5’端，而下游则指3’端。 (一) RNA聚合酶 催化转录的RNA聚合酶是一种由多个蛋白亚基组成的复合酶。 如大肠杆菌的RNA聚合酶有五个亚基组成，其分子量为480,000道尔顿，含有α、β、β’和δ等四种不同的多肽，其中α为二个分子。 α亚基与RNA聚合酶的四聚体核心(α2ββ’)的形成有关; β亚基含有核苷三磷酸的结合位点； β’亚基含有与DNA模板的结合位点； δ因子的作用就是识别转录的起始位置，并使RNA聚合酶结合在启动子部位。 (二) 链的起始 RNA链转录的起始首先是RNA聚合酶在δ因子的作用下结合于DNA的启动子部位; 并在RNA聚合酶的作用下，使DNA双链解开，形成转录泡，为RNA合成提供单链模板，并按照碱基配对的原则，结合核苷酸; 然后，在核苷酸之间形成磷酸二脂键，使其相连，形成RNA新链。 δ因子在RNA链伸长到8－9个核酸后，就被释放，然后由核心酶催化RNA的延伸。 启动子位于RNA转录起始点的上游，δ因子对启动子的识别是转录起始的第一步。 (三) 链的延伸 RNA链的延伸是在δ因子释放以后，在RNA聚合酶四聚体核心酶的催化下进行。 因RNA聚合酶同时具有解开DNA双链，并使其重新闭合的功能。 随着RNA的延伸，RNA聚合酶使DNA双链不断解开和重新闭合。 RNA转录泡也不断前移，合成新的RNA链(图3－26)。 (四) 链的终止 当RNA链延伸遇到终止信号(termination signal)时，RNA转录复合体就发生解体，而使新合成的RNA链释放出来。 现在发现在大肠杆菌中有二类终止信号： 一类只有在存在蛋白质ρ的情况下，转录才会终止，称为依赖于ρ的终止(ρ–dependent terminator)。 第二类使转录终止不需要ρ的参与，所以称为不依赖于ρ的终止(ρ-independent terminator)。 实际上在原核生物中，RNA的转录、蛋白质的合成以及mRNA的降解通常可以是同时进行的。 因为在原核生物中不存在核膜分隔的核，另外，RNA的转录和多肽链的合成都是从5’向3’方向进行，只要mRNA的5’端合成后，即可以进行蛋白质的翻译过程。 在原核生物中mRNA的寿命一般只有几分种。因此，往往在3’端mRNA的转录还没有最后结束，5’端mRNA在完成多肽链的合成后，已经开始降解。 四、真核生物RNA的转录及加工 (一)真核生物RNA转录的特点　真核生物与原核生物RNA的转录过程主要有以下几点不同(图3－27)： 1、真核生物RNA的转录是在细胞核内进行　而蛋白质的合成则是在细胞质内，所以，RNA转录后首先必须从核内运输到细胞质内，才能进行蛋白质的合成。 2、真核生物mRNA分子一般只编码一个基因　原核生物的一个mRNA分子通常含有多个基因，而少数较低等真核生物外，在真核生物中，一个mRNA分子一般只编码一个基因。 3、真核生物RNA聚合酶较多　在原核生物中只有一种RNA聚合酶催化所有RNA的合成，而在真核生物中则有RNA聚合酶I、II、III等三种不同酶，分别催化不同种类型RNA的合成。 4、真核生物RNA聚合酶不能独立转录RNA　在真核生物中，三种RNA聚合酶都必须在蛋白质转录因子的协助下才能进行RNA的转录。 （一）原核生物与真核生物RNA 转录的区别 1. 真核生物RNA 的转录是在细胞核内，翻译在细胞质中进行； 原核生物则在核区同时进行转录翻译； 2. 真核生物一个mRNA 只编码一个基因； 原核生物一个mRNA 编码多个基因； 3. 真核生物有RNA 聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等三种不同的酶； 原核生物则只有一种RNA 聚合酶； 4. 真核生物中转录的起始更复杂，RNA 的合成需要转录因子 的 协助进