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用质粒 构建 重组DNA分子 用噬菌体DNA构建 重组DNA分子 4、重组DNA分子导入受体细胞 把构造好的重组 DNA 分子送进寄主细胞,亦需要适当的技术方法。若受体细胞是细菌,通常称转化;若受体细胞是 动/植物细胞,通常称转染。 ①CaCl2处理的细菌转化法②物理学法——电穿孔法 基因枪法③中间介导法——农杆菌介导④微注射法 5、重组体的筛选 根据载体DNA分子上的筛选标记赋予受体细胞在筛选平板上表型的变化来筛选重组子。 例如由于外源DNA的插入引起抗药性失活。 四、基因工程的应用 基因工程技术已经在医学、工业、农业等各个领域得到了广泛的应用。 1.基因工程药物 将目的基因用DNA重组的方法连接在载体上,然后将载体导入靶细胞,使目的基因在靶细胞中得到表达,最后将表达的目的蛋白质提纯及做成制剂,从而成为蛋白类药或疫苗。 基因工程被用于大量生产过去难以得到或几乎不可能得到的蛋白质-肽类药物。 胰岛素 1000 磅牛胰 10 克胰岛素 200 升发酵液 10 克胰岛素 干扰素 1200 升人血 1 升发酵液 2-3 万美元 / 病人 200-300 美元 / 病人 1976年第一家基因工程技术开发药物的公司建立。 1982年第一个基因工程药物重组人胰岛素正式生产,推向市场。 2002年全球生物技术公司总数已达4284家,美国占34%。 2004年基因重组生物技术药物的年销售额已经突破400亿美元。 2005年市场上的生物技术药物达到200种左右,而在研的药物为600种。 全世界已有2.5亿人使用生物技术药物和疫苗。 国外生物医药的发展 国内生物医药的发展 ——起步晚,起点低,但发展迅速 1989年我国批准了第一个在我国生产的基因工程药物--重组人干扰素。 近年来我国生物制药业销售收入以平均超过20%的速度增长。 2.转基因植物 通过将目的基因导入农作物、园艺作物中,改变它们的遗传特性,使植物免受病虫的危害,或获得抗除草剂的特性,或改变种子种淀粉、蛋白质的含量和组成、或改变花的形状和颜色,或改变植物的育性及改变植物的抗逆性等。 转基因植物可作为一种生物反应器,生产药用蛋白和植物次生代谢产物,或生产某些有机化合物。 转基因植物为人们研究某一基因功能及其再生长发育中的作用提供了强有力的工具。 根癌杆菌介导法 世界上第一种基因移植作物是一种含有抗生素药类抗体的烟草,1983年得以培植出来。 ?? ??1994年,美国政府批准了他们研制成功抗干旱、早熟、保鲜的转基因番茄商品化之后,我国也相继成功培育出优良品种的转基因番茄,以满足人们的需求。 甜椒在栽培的过程中,容易受病毒的感染。我国科学工作者,采用转基因技术,培育出抗病毒的甜椒。 ???? 油菜是人们食用油的主要来源之一。一般油菜籽的含油量约为40%左右。通过转基因技术,培育出来的油菜籽,可以大大地提高它的出油率。而且油的纯度质量更好。 ??? 玉米是主要粮食之一,又可以提炼油脂,也可以用作食品和工业的原料以及作饲料,浑身是宝。人们称它是含金的植物。如今培育出转基因玉米,品质更好,产量更高。 ?我国科学工作者,用转基因技术,可以转变矮牵牛花的花色,使矮牵牛花的花色更加丰富多彩。 ????从植物体中分离出合成赖氨酸的基因,把这基因转入小麦植株中,培育出转基因小麦。用这种转基因小麦制造出来的面粉,更适合用来烤面包,而且面粉中赖氨酸含量高,这种面包的营养价值高。 转基因抗虫棉 1990年,美国利用生物技术,合成苏云金芽孢杆菌 (Bt)杀虫基因,导入棉花获得抗虫转基因棉花。 借助基因工程技术把外源目的基因导入生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎,并在受体染色体上稳定整合,使之经过各种发育途径得到能把外源目的基因传给子代的个体,即转基因动物(transgenic?animal)。 3.转基因动物 转基因动物首先在小鼠获得成功。 把大鼠生长因子转入小鼠 得到巨大型的转基因小鼠。 生物技术将在21世纪成为全球经济与产业的主力,同时也在日常生活各方面深刻地影响我们。本章将简要说明生物技术的定义和内容,希望能把各个重要的领域的操作技术原理说明清楚,以便同学有基本的科学背景,独立判断生物技术所衍生的种种问题。 * 基因工程技术首先在医药领域(60%~80%)实现产业化,占主要地位的是基因工程药物的研究和商品化。 * 基因转化也可應用在人體上,稱為『基因治療』;雖然還不是十分成熟,但技
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