清华大学微生物学微生物营养要点.ppt

第四章 微生物的营养和培养基 第一节 微生物的6类营养要素 第二节 微生物的营养类型 第三节 营养物质进入细胞的方式 第四节 培养基 （一）按对培养基成分的了解作分类 2. 组合培养基 优点：成份精确、重演性高 缺点：价格昂贵、配制麻烦、微生物生长一般 适用：对定量要求较高的工作 3. 半组合培养基 （二）按培养基外观的物理状态作分类 1. 液体培养基 2. 固体培养基 3. 半固体培养基 4. 脱水培养基 第四节 培 养 基 用途：促使微生物生长； 积累代谢产物； 分离微生物菌种； 鉴定微生物种类； 微生物细胞计数； 菌种保藏； 制备微生物制品。 第四节 培 养 基 一、选用和设计培养的原则和方法 二、培养基的种类 第四节 培 养 基 一、选用和设计培养基的原则和方法 目的明确 营养协调 理化适宜 经济节约 1.目的明确 即根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。 不同营养类型的微生物，其对营养物的需求差异很大。 自养型微生物的培养基完全可以（或应该）由简单的无机物质组成。 1.目的明确 异养型生物的培养基至少需要含有一种有机物质，但有机物的种类需适应所培养菌的特点。 当对试验菌营养需求特点不清楚的时候，可以采用‘生长谱’法进行测定。 用于培养菌体种子的培养基营养应丰富，氮源含量宜高； 用于大量生产代谢产物的培养基其氮源一般应比种子培养基稍低，（但若发酵产物是含氮化合物时，有时还应提高培养基的氮源含量）； 1.目的明确 生产次级代谢产物时要考虑是否加入特殊元素或特定的代谢产物 大规模发酵用的培养基，应重视培养基中各成份的来源和价格，应选择来源广泛、价格低廉的原料 1.目的明确 1.目的明确 按微生物的主要类类群来说， 它们所需要的培养基成分也不同： 细菌： 牛肉膏蛋白胨培养基 LB (Luria-Bertani) 放线菌： 高氏一号培养基 真菌： 查氏合成培养基 PDA (Potato-Dextrose-Agar) 酵母菌； 麦芽汁 2.营养协调 ●要素：水 C+能源 〉N源 〉P、S K、Mg 生长因子 含量：10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 ● 一、选用和设计培养的原则和方法 2.营养协调 ●浓度过高——微生物的生长起抑制作用， 浓度过小——不能满足微生物生长的需要。 ●碳氮比（C/N）直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成与积累，故常作为考察培养基组成时的一个重要指标； 2.营养协调 碳源中的碳原子的mol数 氮源中所含的氮原子的mol数 C/N比值= ●速效性氮（或碳）源与迟效性氮（或碳）源的比例 ●各种金属离子间的比例 真菌：碳氮比（C/N）较高 细菌：碳氮比（C/N）较低 2.营养协调 例如，在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中， 培养基碳氮比为4/1时，菌体量繁殖，谷氨酸积累少； 当培养基碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。 3.理化条件适宜 pH 水活度 氧化还原电位 3.理化适宜 （1）pH 各类微生物的最适生长pH值各不相同： 细 菌：7.0~8.0 放线菌：7.5~8.5 酵母菌：3.8~6.0 霉 菌：4.0~5.8 3.理化适宜 （1）pH 在微生物的生长和代谢过程中，由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累，培养基的初始pH值会发生改变 怎么维持培养基pH值的相对恒定？ 3.理化适宜 （1）pH 维持培养基pH值的相对恒定，常采用下列两种方式： 外源调节：按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液 内源调节：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；调节培养基的碳氮比。（磷酸缓冲液、碳酸钙） 3.理化适宜 （1）内源调节： 磷酸缓冲液 碳酸钙 （溶解度较低） （2）渗透压和aw 渗透压： 　　两种不同浓度的溶液间，若被一个半透性薄膜隔开时，稀溶液中的水分