生物必修一实验：检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质要点.pptVIP

☆思考讨论 你能举例说出哪些植物器官的细胞中富含糖 类,脂质和蛋白质吗? 比较斐林试剂与双缩脲试剂不同点 * 植物叶肉细胞.果实细胞和种子细胞中通常含有较多的糖类、脂质和蛋白质 禾谷类果实、种子： 甘蔗的茎、甜菜的根： 花生、芝麻种子： 大豆种子： 蔗糖(二糖) 淀粉(多糖) 脂质 蛋白质 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 第二章 组成细胞的分子 应用某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。 实验原理 还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖）+斐林试剂→砖红色沉淀 Cu2O 脂肪 + 苏丹Ⅲ→橘黄色 苏丹IV→红色 蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色络合物 实质： 在碱性条件下，蛋白质与Cu2+反应生成紫色或紫红色络合物。 基本步骤 选材→样液制备→加入试剂→颜色反应 →观察→结果→结论 选材的原则 实验现象明显（富含检测之物，避免干扰）； 便于处理，易获得； 经济节约； 1、选材：　　 含糖较高、颜色为白色或近于白色的 植物组织，苹果、梨最好。 2、制样：　　 苹果切块→研磨→过滤→滤液 4、检测：　　 3、试剂：　　 甲液：0.1g/mL NaOH 乙液：0.05g/mL CuSO4 组织样液（2ml）→斐林试剂 （1ml）→ 振荡混匀→50℃~ 65℃水浴加热2min； → 观察试管中溶液颜色的变化 注意事项 1.斐林试剂不稳定， 需混匀后使用！ 2.本实验对试管中的溶液进行加热时，试管底 部不要接触烧杯底部； 3.另外，试管口不要朝向实验者，以免沸腾的 溶液冲出试管，造成烫伤。 还原糖的检测结果 检测方法 方法一：用苏丹染液检测组织样液 方法二：制作子叶临时切片，显微 观察子叶细胞的着色情况。 特别提醒： 实验用的花生种子需提前浸泡3-4h,浸泡时间太短，不易切片;浸泡时间太长，则组织太软，切下的薄片不易成形。　 取材： 花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片 制片 ①取最理想的薄片 ②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液（2～3min） ③去浮色（如何去浮色） ④ 制成临时装片 1-2滴体积分数为 50%的酒精溶液 观察 低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒， 然后用高倍镜观察 结果及结论： 圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。 脂肪的检测结果 1、选材：　　 2、制样：　　 4、检测：　　 3、试剂：　　 浸泡1-2天的黄豆种子（或用豆浆） 或用鸡蛋蛋白 黄豆浸泡切片→研磨→过滤→滤液 A液：0.1g/mL NaOH B液：0.01g/mL CuSO4 组织样液（2ml）→ 双缩脲试剂A （1ml） →双缩脲试剂B （4滴 ）→观察溶液颜色 的变化 以造成碱性环境 思考：为什么要先加入A液再入B液？ 注意事项： 1、如果用鸡蛋清，应加以稀释，若稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗干净。 2、鉴定之前,可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比,这样可以增强说服力。 作对照 蛋白质的检测结果 花生 马铃薯 黄豆 梨 来自那种生物材料 + + + + + + - - D - - + + + + + + C + + + + + + - - B - - - - + - + + A 脂肪 淀粉 蛋白质 还原糖 成分 待侧样品 实验记录 1、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能过量？ 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。 2、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部 而无法参与反应。 深化 斐林试剂 双缩脲试剂 甲液 乙液 A液 B液 成分 鉴定物质 使用方法 反应条件 反应现象 0.1g/ml NaOH 蛋白质 等量混合，现配现用 先加A液1ml,创造碱性环境，再加B液4滴 50-65°C水浴加热 不加热处理 砖红色沉淀 紫色反应 0.05g/