第二章1_染色体技巧.ppt

螺线管纤维（solenoidal fiber）：染色体DNA二级包装 由6个核小体盘绕形成中空螺线管，其外径为30 nm，因此，螺线管的形成使DNA一级包装又压缩了6倍。 若以充分伸展的DNA双螺旋论，每个螺线管包含了408 nm（6×68 nm）长度的DNA链，而每圈螺线管的长度几乎等于核小体直径，即11nm，故染色体的二级包装相当于将DNA长度压缩了近40倍。 30nm螺线管 超螺线管：染色体DNA的三级的包装 由螺线管纤维缠绕在一个由某些非组蛋白构成的中心轴（centralaxis）骨架上形成超螺线管，压缩比40。 环状螺线管纤维进一步包装。形成染色单体，压缩比5。 经各级包装后染色体DNA总共被压缩了近10000倍（7×6×40×5）。 中心粒 端粒 核基质 30nm 纤丝构成环 姊妹染色单体 染色单体 （1）数量庞大 （2）存在重复序列。 （3）基因组中存在大量不编码蛋白的区域。 （4）真核细胞基因转录产物为单顺反子。 （5）大部分基因含有内含子，因此，基因是不连续的（断裂基因，split gene）。 （6）存在大量的DNA顺式作用元件（启动子，增强子，沉默子等） 4.真核生物基因组DNA的特征 （7）存在大量的DNA多态性（SNP和串联 重复序列多态性） （8）真核生物基因组存在端粒。 端粒（telomere）是真核生物线性基因组的DNA末端的特殊DNA序列和蛋白质复合体，端粒的长短和DNA复制的完整性，保护末端，细胞的衰老相关。为分子生物学研究具体热点之一。 原核生物基因组：E.coli闭合环状DNA组成类核区 在E.coli类核中，DNA压缩成一个手脚架状的支架结构，在结构的中心是几种蛋白质的复合体。DNA与这些蛋白质结合成为100个左右的小结构域，每个结构域具有不同程度的超螺旋结构，并在每个结构域的两端被蛋白质固定，因而每个小结构域保持相对独立性。 原核生物染色体DNA通常与细胞膜相连，连接点的数量随其生长状况和生活周期的不同而不同。 染色体基因组和染色体外遗传因子 原核生物DNA含量较少，大多只有一条环状的染色体，称为染色体基因组。 某些原核生物还存在质粒，真核生物存在线粒体，叶绿体等，他们同样含有DNA和功能基因，这些DNA物质同样被称作为染色体外遗传因子 3.原核生物DNA的特征 （1）结构简练。 不转录的DNA序列非常的少，一般没有内含子（ T4的胸腺嘧啶核苷酸合成酶基因中存在内含子）。大都带有单拷贝基因，只有很少数基因〔如rRNA基因〕是以多拷贝形式存在。 （2）存在转录单元：多顺反子mRNA。 原核生物当中功能相当的RNA和蛋白质基因往往成丛集出现在一个或者某几个部位形成，可以被转录成为还有多个mRNA的分子，叫做多顺反子mRNA。如phiX174和大肠杆菌的部分多顺反子等。 （3）具有重叠基因： 1977年Sanger发现phiX174 具有重叠基因。（phiX174, 5375nt，编码9个蛋白质，总分子量2.5X105,理论上需要6078nt核苷酸编码。） 第二章 染色体与DNA 染色体 DNA的结构 DNA的复制 原核生物与真核生物DNA的复制特点 DNA的修复 DNA的转座 第一节 染色体 1.染色体和染色质:可被碱性染料如龙胆紫等染色 端粒 端粒 着丝粒 2. 原核和真核生物染色体比较 原核生物 真核生物 数目: 一般1条 多条 形态: 共价闭合双链分子 线性分子 结构: 类核结构：中央部 分由RNA和支架蛋 无类核结构 白组成，外围是DNA 组成： 原核生物： 与DNA结合的蛋白质少；结合不紧密，蛋白质与DNA的折叠、复制、重组及转录有关。 真核生物：蛋白质（组蛋白和非组蛋白） DNA; 质量比：2 : 1; 结合紧密。 DNA含量： 原核生物 低，基因数少。 真核生物 高，基因数多。 5.真核生物染色体的组成 由DNA、组蛋白和非组蛋白组成。 组蛋白是染色体的结构蛋白，它与DNA组成核小体。通常可以用2 mol/L NaCl或0.25 mol/L的HCl/H2SO4处理使组蛋白与DNA分开。 组蛋白分为H1、H2A、H2B、H3及H4。这些组蛋白都含有大量的赖氨酸和精氨酸，其中H3、H4富含精