MS培养基的配制与灭菌11.docVIP

MS培养基的配制与灭菌 一、目的要求 二、仪器与 1.器材： 高压灭菌锅、移液管、量筒、培养瓶（三角瓶）、烧杯、标签pH试纸电炉 2.试剂：配制MS培养基的各种母液、生长调节剂、琼脂、蔗糖、、0.1 mol/L和0.5mol/L NaOH以及浓度为0.1 mol/L和0.5mol/L的HCl。 三、方法步骤 （一）MS固体培养基的配制元素 试剂名称 用量 琼脂 8g/L 蔗糖 50g/L 大量元素 50ml/L 维生素和氨基酸 5ml/L 微量元素 5ml/L 铁盐 5ml/L 6-BA 0.5ml/L NAA 0.2ml/L 3.在容器内加入相当配制量1/3的水，加入琼脂溶煮，再根据计算依次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节物质等，最后加入蔗糖并搅拌均匀,加水定容，搅拌均匀。 4.调整pH值，使PH为5.5～6.0。 5.尽快分装，培养基占容器的1/5--1/4为宜，尽量避免培养基沾到容器内壁或容器口，标记日期。 6.封口。 （二） MS固体培养基的灭菌——高压蒸汽灭菌（湿热灭菌法） 1洗涤：把组织培养基用的培养皿、三角瓶、试管等玻璃器皿进行彻底清洗。自然晾干或烘箱干燥 2.包扎：用纱布把包扎好 3.装水：在高压灭菌锅内装入一定量的水 4.装物品：在灭菌锅内放入含培养基的培养瓶或三角瓶，以及包扎好的玻璃器皿 5．灭菌：温度为121时，维持20分钟，即可达到灭菌的目的。若灭菌时间过长，会使培养基中的某些成分变性失效。开盖后应尽快转移培养瓶，使培养瓶冷却、凝固。