选1-3-1菊花的组织培养汇编.pptVIP

菊花的组织培养 （1）细胞的分化 ①概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 . ②过程： 如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统. ③原因： 基因选择性表达的结果. 分化后细胞的异同 相同点是遗传物质相同 不同点是形态结构和功能不同 一、基础知识 （2）细胞的全能性 ①定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性. ②原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因. 受精卵生殖细胞体细胞 ③全能性的比较: 植物细胞表现全能性的条件 1.必须离题 2.一定的营养物质 3.适宜的培养条件 一、基础知识 指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。 又称：植物离体培养 一、基础知识 (3)植物组织培养 二、植物组织培养的基本过程 植物组织培养 细胞离体 ①必要条件： 一定的营养物质、激素和其他外界条件 ②原理: 细胞的全能性 A.外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官. ③相关概念: B.脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 C.再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程 D.愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞. 愈伤组织 三、影响植物组织培养的因素： 1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 未开花植物的茎上部新萌生的侧枝 1.培养基的各种营养物质的作用是什么？ 2.MS培养基的配房与微生物的培养基配方相比有哪些明显不同？ （1）微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必须的无机盐； （2）蔗糖提供碳源、同时维持细胞渗透压 （3）甘氨酸等主要是为了满足特殊的营养需求 微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需要提供大量的无机营养，包括植物生长所必须的大量元素和微量元素。 3、不同植物激素使用顺序 使用顺序 实验结果 先生长素， 后细胞分裂素 先细胞分裂素， 后生长素 同时使用 有利于细胞分裂但不分化 细胞既分裂也分化 分化频率提高 4、不同植物激素使用量 生长素/细胞分裂素比值 结果 比值高时 比值低时 比值适中 促根分化，抑芽形成 促芽分化，抑根形成 促进愈伤组织生长 5、pH、温度、光照（菊花组培） pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 6、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境 离体组织或细胞 植物体 细胞分裂素≈生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素生长素 植物细胞培养 不需要光 需要光 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 四、实验操作 移 栽 1.洗衣粉软刷刷洗，流水冲20min； 2.70％酒精摇动2-3次，持续6-7s，无菌水冲洗； 3.0.1％氯化汞1-2min，无菌水冲洗至少三次之上 配制各种母液配制培养基灭毒 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 四、实验操作 移 栽 无菌箱 温度18-22℃ 每日光照12h 1.70％酒精工作台擦拭一遍 2.点燃酒精灯，每次操作酒精灯旁边进行 3.每次使用的器械都要灼烧灭菌 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 培养几天后若有颜色的绒毛菌落，属于_________菌落，肯能是植物体材料灭菌不当；若是有光泽的粘液状菌落，属于__________污染，可能是由接种人员造成的，比如：未戴口罩，接种时说话，手及器具消毒不净。 真菌 细菌 发现的被污染的培养基，特别是真菌性的污染，一定不能打开培养基，而应用高压蒸汽锅灭菌。 结果分析与评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格 菊花的组织培养 再 分化 材料