培养基配制中注意事项.docVIP

/座机电话号码5/blog/1座机电话号码1 /座机电话号码5/blog/1座机电话号码2 /座机电话号码8/blog/1座机电话号码2 B5培养基成分 使用浓度 mg/L 大量元素 KNO3 2500 MgSO4·7H2O 250 CaCl2·2H2O 150 NH4 2SO4 134 微量元素 KI 0.75 H3BO4 3.0 MnSO4·4H2O 10 ZnSO4·7H2O 2.0 Na2MoO4·2H2O 0.25 CoCl2·6H2O 0.025 铁盐 CuSO4·5H2O 0.025 Na2-EDTA 37.3 FeSO4·7H2O 27.8 有机成分 肌醇 100 烟酸 1.0 盐酸吡哆醇 1.0 盐酸硫铵 10 注意事项 1、现在一般用通用铁盐代替草酸铁。 　　2、过磷酸钙先用盐酸溶解，再加入培养基中。 3、现在琼脂质量较好，具体用量，自己掌握。 4、用于兰花播种和组织培养，具有较好的缓冲能力 B5培养基的组成和配方 组成成分 数量 mg/l） KNO3 2500 大量元素 CaCl2·2H2O 150 MgSO4·7H2O 250 NH4 2SO4 134 KI 0.75 H3BO4 3.0 MnSO4·4H2O 10 微量元素 ZnSO4·7H2O 2.0 Na2MoO4·2H2O 0.25 CoCl2·6H2O 0.025 CuSO4·5H2O 0.025 铁盐 Na2-EDTA 37.3 FeSO4·7H2O 27.8 肌醇 100 烟酸 1.0 有机成分 盐酸吡哆醇 1.0 盐酸硫铵 10 N6培养基配方 组成成分 数量 mg/l） 硝酸钾 KN03 2830 硫酸铵 NH4SO4 463 大量元素 氯化钙 CaCl2·2HzO 166 硫酸镁 MgSO4·7H20 185 磷酸二氢钾 KH2PO4 400 硫酸亚铁 FeSO４·7H20 27.8 硫酸锰 MnS04·4H20 4.4 微量元素 硫酸锌 ZnSO4·7H20 1.6 硼酸 H2BO3 0.8 碘化钾 KI 1.6 甘氨酸 2 有机成分 烟酸 0.5 盐酸硫胺素 维B1 1.0 盐酸吡哆素 维B6 1、大量元素母液的配制 各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。后用蒸馏水定容到 1000ml的容量瓶中，即为10倍的大量元素母液。到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。 注意： 1 配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+、SO42－、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。特别应将Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。 2 CaCl2·2H2O要在最后单独加入，在溶解CaCl2·2H2O 时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的CO2，以防沉淀。另外，CaCl2·2H2O放入沸水中易沸腾，操作时要防止其溢出。 ２、微量元素母液的配制 MS培养基的微量元素无机盐由7种化合物（除Fe ）组成。微量元素用量较少，特别是 CuSO4·5H2O、 CoCl2·6H2O ，因此在配制中分微量Ⅰ、Ⅱ配制。按照表2，表3配方，用电光天平称量，其它同大量元素。配制培养基时，每配制1L培养基，取微量Ⅰ10ml，微量Ⅱ0.1ml。 3、铁盐母液的配制 铁盐不是都需要单独配成母液，如柠檬酸铁，只需和大量元素一起配成母液即可。目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物，必须单独配成母液。这种螯合物使用起来方便，又比较稳定，不易发生沉淀。配制方法同上，直接用蒸馏水加热搅拌溶解，定容至1L。配制培养基时，配制1L取此液10ml。 注意： 在配制铁盐时，如果加热搅拌时间过短，会造成FeS04和Na2-EDTA 鳌合不彻底，此时若将其冷藏，FeSO4会结晶析出。为避免此现象发生，配制铁盐母液时，FeSO4和Na2-EDTA 应分别加热溶解后混合，并置于加热搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色 约加热20 - 30 min ，调pH值至5 .5，室温放置冷却后，再冷藏。 4、有机母液的配制 MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、盐酸硫胺素和盐酸吡哆素。培养基中的有机成分原则上应分别单独配制。配制直接用蒸馏水溶解，定容至1L，注意称量时用电子分析天平。配制培养基时，每配1L培养基取此液5ml。 注意： 由于维生素母液营养丰富，因此贮藏时极易染菌。被菌类污染的维生素母液，有效浓度降低，并且易给后期