DNA的复制和修复2重点.pptVIP

复制的忠实性 DNA复制过程是一个高度精确的过程，据估计，大肠杆菌DNA复制5?109碱基对仅出现一个误差，保证复制忠实性的原因主要有以下三点: ? DNA聚合酶的高度专一性（严格遵循碱基配对原则，但错配率为7 ?10-6 ） ? DNA聚合酶的校对功能（错配碱基被3’-5’ 外切酶切除） ? 起始时以RNA作为引物 DNA聚合酶的校对功能 5′-核酸外切酶 3′-核酸外切酶 裂缝 聚合中心 裂缝内部 DNA聚合酶的校对功能 聚合酶 错配硷基 复制方向 正 确核苷酸 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 切除错配核苷酸 起始时以RNA作为引物的作用 DNA复制为什么要合成一个RNA引物，而后又把这个引物消除呢？这是保证DNA聚合过程高度精确的又一措施。已知DNA 聚合酶具有3??5?外切酶功能校对复制过程中的核苷酸，也就是说聚合酶在开始形成一个新的磷酸二酯键前，总是检查前一个碱基是否正确，这就决定了它不能从头开始合成。因此先合成一条低忠实性的多核苷酸来开始DNA的合成，并以核糖核苷酸来表示是“暂时”的，当DNA开始聚合以后再以5??3?外切酶的功能切除，以高忠实性的脱氧核苷酸取而代之，确保复制的忠实性。 真核细胞DNA复制的特点 ? 多个起点复制 起点 起点 起点 起点 起点 起点 ? 真核生物的DNA聚合酶 ? 端粒（telemere）复制 真核生物的DNA聚合酶 DNA 聚合酶 ? 分子量 亚基数 细胞内分布 酶活力百分比 外切酶活力 DNA 聚合酶 ? 110-23，000 多个 细胞核 ～80% 无 120，000 一个 细胞核和线粒体 2 ～15% 无- 400，000 一个 细胞核+ 10 ～25% 5?-3 ?外切酶 DNA 聚合酶 ? DNA 聚合酶 ? 45，000 一个 细胞核 10 ～15% 无 端粒酶（telomerase） DNA复制需要引物，但在线形DNA分子末端不可能通过正常的机制在引物被降解后合成相应的片段.如果没有特殊的机制合成末端序列，染色体就会在细胞传代中变得越来越短。这一难题是通过端粒酶的发现才得到了澄清，端粒酶是一种含RNA的蛋白复合物，实质上是一种逆转录酶，它能催化互补于RNA模板的DNA片段的合成，使复制以后的线形DNA分子的末端保持不变。 初步研究表明，人体中生殖细胞的端粒长度保持不变，而体细胞的端粒长度则随个体的老化而逐步缩短。对此的一个推论是：人的生殖细胞具端粒酶的活力，体细胞则否。这一问题的解决无疑会有助于对生命衰老的认识。 5′ 3′ AAAACCCCAAAACCC C C C A 端粒酶 端粒合成的一种模型 3′ 5′ TTTTGGGGTTTTG 5′ 3′ AAAACCCCAAAACCC C C C A AA 3′ 5′ TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTG 5′ 3′ AAAACCCCAAAACCC C C C A AA T TGGG TGGG T 3′ 5′ AA TTTTG 5′ 3′ AAAACCCCAAAACCC C C C A GTTTTG 整合和杂交 移位和再杂交 端粒合成的完成 TTTTGGGG TTTTGGGG TTTTGGGGTTTT 5′ 3′ n AA 3′ TTTTGGGG TTTTGGGG TTTTGGGGT 5′ 3′ TT CCCCT n AA 3′ TTTTGGGG TTTTGGGG TTTTGGGGT 5′ 3′ TT AAAACCCC AAAACCCC AAAACCCCT n 进一步加工 继续延伸 真核和原核DNA细胞复制比较 第二节 DNA的损伤与修复 某些物理化学因子，如紫外线、电离辐射和化学诱变剂等，都有引起生物突变和致死的作用，其机理是作用于DNA，造成DNA结构和功能的破坏，称为DNA的损伤. DNA的修复主要有以下类型: 暗修复 四、诱导修复（SOS修复） 一、光裂合酶修复 二、切除修复 三、重组修复 DNA紫外线损伤的光裂合酶修复 1、形成嘧啶二聚体 2、光复合酶结合于 损伤部位 3、酶被可见光激活 4、修复后酶被释放 DNA的损伤和切除修复 碱基丢失 碱基缺陷或错配 结构缺陷 切开 核酸内切酶 核酸外切酶 切除 DNA聚合酶 DNA连接酶 AP核酸内切酶 核酸外切酶 切开 切除 修复 连接 糖苷酶 插入酶 碱基取代 DNA的重组修复 胸腺嘧啶二聚体 复制 核酸酶及重组蛋白 修复复制 DNA聚合酶 DNA连接酶 重组 SOS反应的机制 未诱导的细胞 靶基因 lexA基因被LexA 蛋白质部分阻遏 recA基因被LexA 蛋白质部分阻遏 （?40个不同的位点被阻遏） L