第十章细胞学检查技术分析.pptVIP

第十章 细胞学检验技术 病理学 活体组织检验 细胞病理学 脱落细胞学检验 细针穿刺吸取细胞学检验 一、应用范围 (一)诊断某些良性病变 如宫颈涂片，诊断滴虫阴道炎；淋巴结穿刺诊断慢性淋巴结炎等。 (二)适用于阴道脱落细胞学检验 可判断女性雌激素水平，了解卵巢功能状态和确定卵巢排卵时间。 (三)用于肿瘤治疗后的随诊观察 判断肿瘤切除或放疗后的疗效以及有无复发和转移等。 (四)发现癌前病变 及时治疗癌前病变，干预癌变过程。 (五)用于诊断癌 适于防癌普查 二、细胞学检验的优点与不足 (一)优点 1．方法简单易学，容易掌握。 2．设备简单、容易推广，费用低。 3．安全，患者痛苦少或无痛苦，可反复取材检验，无不良反应 4．制片技术简捷，报告快速，出报告时间短。 5．癌细胞检出率较高，如技术条件好，采集细胞方法正确，某些肿瘤阳性率可达80％～90％。尤其对某些无明显临床表现的恶性肿瘤，如隐性肺癌，能够得到早期诊断。 6．可以对某些器官局部(如宫颈)进行多位点的脱落细胞学检查 (二)不足 1．取材不准，涂片过厚过薄，影响诊断结果 2．对黏膜表面的脱落细胞和体腔抽出液中的脱落细胞，难以分辨其微细结构。 3．标本采集的是散在细胞成分，不能全面观察病变组织的结构层次，因此不利于对肿瘤做组织学分型。 4. 无法确定肿瘤位置和深度 5. 脱落细胞易受人为因素影响。 三、注意事项 1. 正确采集标本 2. 保证制片质量 3. 认真阅片 4. 努力学习，善于总结 5. 加强和临床联系 6. 应用推广新技术 第二节 标本的采集和制片 一、标本采集 （一）标本采集原则 及时、正确、清洁、防止并发症 （二）标本采集方法 直接采集法 摩擦法 液体抽吸法 液体标本的采集 灌洗法 二、涂 片 (一)涂片操作注意事项 1．操作要轻巧，避免人为损伤脱落细胞。 2．厚薄要适宜。涂片太厚，细胞容易重叠，不利于镜检；涂片太薄，片中细胞数量太少，容易漏诊。 3．涂片应均匀。细胞成分应涂布在玻片的三分之二范围内，以利于观察和摄影，余1／3留作贴标签。 4．同一标本至少一次涂两张涂片，要做好标记，刻写编码，防止错号与漏诊的发生。 (二)涂片操作方法 1．推片法 通常把标本低度离心或自然沉淀后推片。方法是两手各持一张玻片，甲玻片前部涂有样品，然后将样品处与另一手上玻片之间形成40度左右夹角，将载玻片上的细胞标本匀速推动，做成细胞涂片。注意：因癌细胞体积较大，常位于细胞涂膜的尾部，因此推片时不要将尾部推出玻片外 2．涂抹法 为细胞学标本最常用的方法，常用棉签棒、针头或吸管将标本均匀涂抹于玻片上，应注意：涂片动作应轻柔利索，沿一个方向，一次涂抹而成。一般有往复涂抹法和转圈涂抹法。 3．拉片法 常把小滴状标本，置于两张载玻片之间，稍加压力反向拉开，即成两张厚薄均匀的涂片。选拉片法制片可适用于痰、胸腹腔积液和穿刺细胞标本。 4．喷射法 适用于液体标本。方法是在距离玻片2～3 cm的高度处，用配有细针头的注射器将标本均匀、反复地喷射在玻片上。此法适用于各种吸取液体标本的制作。 5．印片法 此法为活体组织检查的辅助方法。方法是将小块新鲜的病变组织在玻片的不同部位，印按3～4次后拿开 三、固定 固定(fixation)的主要目的在于保持细胞的自然形态，防止细胞自溶或细菌性腐败，保持细胞内蛋白质、糖等成分易于着色。 (一)常用固定液 1．95％乙醇固定液 为最常用的固定液，适合大规模防癌普查时使用，但渗透性较差。 2．乙醚乙醇固定液 此固定液渗透性强，固定效果好，适于一般细胞学染色，如巴氏染色和HE染色。 3．三氯甲烷乙醇固定液 又称卡诺(carnoy)固定液，穿透力强，固定效果好。由于试剂价格较贵，配置麻烦，一般只用于核酸染色、糖原染色和黏蛋白染色等特殊染色。 4．甲醇 固定效果好，结构清晰，常用于瑞氏、MGG或免疫组化染色的自然干燥涂片的预固定。 (二)固定方法 1．带湿固定法 即涂片尚未干燥时即进行固定的方法，适用于痰、宫颈刮片及食管拉网涂片的固定，不适用于太稀薄的标本 浸入法：可将涂片直接浸入容器的固定液中浸泡10～30 min多数标本用此法固定。 滴加法：或把涂片平放在染色架或桌面上，把固定液滴加在涂片上盖满涂片膜，此法可防止细胞脱落。常用于需做瑞氏或MGG染色的胸腹腔积液、尿及穿刺细胞涂片。 2．干燥固定法 待涂片自然干燥，再滴