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淀粉酶实验报告
实验五 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用
1.淀粉麦芽糖 或葡萄糖 非还原糖 还原糖
蔗糖 葡萄糖+果糖
非还原糖 还原糖 还原糖
2.
1.蔗糖
1 实验用的蔗糖必须保持纯净,实验前先用斐林试剂检验一下,如无砖红色沉淀产生,则可供学生实验用。
2 蔗糖溶液应现用现配,以免时间过长后被微生物分解成还原糖,影响实验效果。
2.质量分数为2%的新鲜的淀粉酶溶液
考虑酶所需要的特定条件,在使用时,要保证其适宜的温度和pH,不要因实验之外的因素影响酶活性的发挥。
3.斐林试剂
1 组成
①质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液。
②质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液。
2 使用方法:①现用现配。
②混合均匀后使用。
3 作用:检验还原糖的存在。
操作 顺序 项目 试管 1号 2号 1 注入可溶性淀粉溶液 2 mL / 2 注入蔗糖溶液 / 2 mL 3 注入新鲜的淀粉酶溶液 2 mL 2 mL 4 ℃热水保温 5 min 5 min 5 注入斐林试剂,并振荡 2mL 2 mL 6 加热至煮沸 1 min 1 min 7 观察实验现象 有砖红色沉淀 无砖红色沉淀 结论 淀粉酶只能催化淀粉水解为麦芽糖,而不能催化蔗糖水解,说明酶的催化作用具有专一性 一、对实验步骤的理解
1.实验步骤的顺序性
用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖反应后,再用斐林试剂鉴定,根据是否有砖红色沉淀来判断淀粉酶是否对二者都有催化作用,从而探究酶的专一性。
二、注意事项
1.水浴煮沸用的开水,需提前备好,以缩短实验时间。
2.制备的可溶性淀粉溶液,必须完全冷却后才能使用。如果用刚煮沸的可溶性淀粉溶液进行实验,就会因温度过高而破坏淀粉酶的活性。
3.两支试管保温时应控制在 ℃左右,低于50 ℃或高于75 ℃,都会降低反应速率。
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