“靳三针头穴”对宫内窘迫大鼠大脑皮质NO、GSHPX表达影响.pdfVIP

天，每只大鼠针刺介入治疗的时间都为一周。所有新生大鼠在出生后45天进行行为 学测定，包括悬吊试验、斜坡试验。通过对新生HIBD大鼠行为学的检测，可以反映 出针刺对HIBD新生大鼠因缺血缺氧造成神经元损伤是否具有修复作用。 采用硝酸还原酶法检测幼鼠大脑皮质中NO的浓度。NO在神经干细胞凋亡的过 程中起到多方面的诱导作用，它能抑制线粒体呼吸酶，促进细胞能量衰竭，进而通过 氧自由基损伤的途径参与诱导神经干细胞的凋亡。此外，它还能促进凋亡诱导因子在 细胞核中的累积，直接损伤DNA，并抑制DNA修复酶的生成。故可通过对幼鼠大脑 皮质组织中N0含量测定来反映大脑皮层缺血灶中的新生神经细胞凋亡程度。 采用二硫代二硝基苯甲酸法检测大鼠大脑皮质中GSH-Px的活性。GSH—PX广泛存 在机体内，它是一种重要过氧化物分解酶，参与了体内氧自由基的代谢，能特异地与 还原型谷胱甘肽(GSH)结合并使其发生过氧化物的还原反应。当大鼠发生脑缺血缺 氧时，脂质过氧化物增加，过剩的氧自由基未能及时清除，就会损伤脑神经细胞并促 进其凋亡。GSH—PX酶能清除体内过剩的具有毒性的过氧化物代谢产物，对于保护细胞 膜结构和功能完整具有重要作用。因此通过检测GSH—PX含量，可以反映机体对氧自 由基清除的能力，进而阐释针刺介导的治疗对受损神经元的干细胞是否具有修复及抑 制凋亡功能。 结论： 文献研究 I古代传统中医对小儿脑病的病因病机的认识和临床经验十分丰富，也为现代中 医治疗脑病的研究和发展提供了理论基础，使现代中医在药物、针灸、推拿上对此病 的治疗有所进展，但在临床上仍缺乏统一规范的治疗方法以及疗效评价方案。 2现代医学通过研究新生儿缺氧缺血性脑病的病因病机和病理生理，以支持疗法 和对症处理为主要治疗方向，多采用高压氧、亚低温、神经营养因子、炎症抑制因子、 神经干细胞移植等，再加上适当的康复训练，但总体疗效不佳，且费用昂贵。 实验研究 1模型的建立：取新生大鼠出生后第21天脑组织，切片后行HE染色，镜下显示 呈典型的缺氧缺血性脑损伤，与正常组组相比，可见神经细胞明显病理形态学改变， 锥体细胞体积缩小，数量减少，细胞变成三角形，胞浆呈均匀的嗜伊红染色，胞核浓 缩深染，结构消失，证明造模成功。 2行为学检测：在行为学方面，悬吊实验结果显示，出生后第14、17、20天接 受针刺组的悬吊时间明显比模型组的长，差异具有统计学意义(P0．05)；斜坡实验 结果显示，出生后第14、17、20、23天接受针刺组的斜坡试验完成时间较模型组的 短，差异具有统计学意义(P0．05)。说明早期针刺介入治疗有利于新生HIBD大鼠 因缺血缺氧造成的神经元损伤导致行为学异常的恢复。 3 NO的检测：采用硝酸还原酶法检测大鼠大脑皮质中NO的浓度，结果显示模 型组明显高于针刺组，针刺组低于正常组(PO．OS)，差异有统计学意义，且出生14 天接受针刺到29天开始针刺组的NO的含量与32天以后接受针刺组相比(p0．OS)， 差异有统计学意义。NO浓度的变化可以说明HIBD新生大鼠尽早接受针刺对于减轻大脑神 经细胞的凋亡明显高于晚接受和不接受针刺的大鼠。 4 GSH—PX的检测：采用二硫代二硝基苯甲酸法检测大鼠大脑皮质中GSH-PX的 浓度，结果显示正常组与针刺组、模型组三组无明显差别(PO．OS)，差异无统计学 意义；且针刺组与模型组相比(P0．OS)，差异无统计学意义；不同针刺介入时间新 生大鼠的GSH—PX含量无明显差异(PO．OS)。说明针刺干预HIBD大鼠，不能增加 GSH-P×的表达，来清除受损组织产生的过多氧自由基，可能是通过其他酶系统如过 氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAl．，来起到保护受损脑组织的作用。 关键词：缺氧缺血性脑损伤：细胞凋亡；靳三针；一氧化氮；谷胱甘肽过氧化物酶 The l nf l uence of J i n’s three need I e treat i ng H I BD neonata l rats i n NO andGSH-PX express i on SpeciaI ity：Acupuncture and Moxibustion Author：j iang zhang ren Tutor：yuan qing Abstract Background Neonatal hypoxic ischemic encephalopathy(HIE) is a central neuronal damage because of asphyxia，hypoxia in perinatal period．Which is a serious complication of neonatal asphyxia，a critical condition，high fat