* * * * * * * * * 生态学实验 周长发 zhouchangfa@njnu.edu.cn 实验一温度胁迫对植物的影响 温度对生物的作用 最适温度、低温限度和高温限度 低温的危害 温度低于一定数值,生物便会受害,这个数值称为临界温度 在临界温度以下,温度越低生物受害越重。低温对生物的伤害可分为冷害和冻害两种 低温的危害 冷害:是指温度在0℃以上对喜温生物造成的伤害。植物寒害的主要原因有蛋白质合成受阻、碳水化合物减少和代谢紊乱等。 低温的危害 冻害:是指0℃以下的低温使生物体内(细胞内和细胞间)形成冰晶而造成的损害。植物在温度降至冰点以下时,会在细胞间隙形成冰晶,原生质因此而失水破损 低温致死的原因 冰晶使原生质破裂,损坏细胞结构 失水或脱水使蛋白质变性及沉淀 代谢失调及停止 高温的危害 温度超过生物适宜温区的上限后就会对生物产生有害影响,温度越高对生物的伤害作用越大 高温的危害:植物 高温可减弱光合作用,增强呼吸作用,使植物的这两个重要过程失调 高温的危害:植物 破坏植物的水分平衡,促使蛋白质凝固、脂类溶解,导致有害代谢产物在体内的积累 Problems at high temperatures protein stability loss of water to stay cool evaporative cooling enzyme substrate moderate temperature high temperature 温度胁迫对植物的影响 实验原理 高温和低温影响细胞膜半通透性,原生质外渗 通过糖的显色反应,测知植物细胞物质的外渗程度,以了解植物受害情况 实验目的和要求 高低温对植物和植物细胞的损伤 温度因子的作用 主要实验仪器与器材 721 型分光光度计、电子天平、电冰箱、温箱、水浴锅、小麦 实验步骤1 小麦幼苗的培养(已备好) 实验步骤2 标准曲线绘制 取标准葡萄糖溶液将其稀释成一系列不同浓度的溶液,浓度分别为0、5、10、20、40、60、80、100μg·ml-1。各取溶液1mL于干洁的试管中,加入蒽酮试剂5mL混合之,于沸水浴中煮沸15 min,至室温后测光吸收度。 实验步骤3:比色反应 取出幼苗,尽量不要伤害根系,用镊子除去幼苗上残留的胚乳,用蒸馏水漂洗数次,以除去伤口上的物质 然后分3组(每组5根小麦幼苗),分别放在盛有20 mL蒸馏水的小烧杯中,务必将根系浸入蒸馏水中,将一杯放在45oC温箱中,一杯放在0~2oC冰箱中,另一杯留在室温条件下 实验步骤3: 培养、放置于 45℃,0-2℃,室温下1小时 实验步骤4 1小时后,取出3杯溶液,达到室温, 各取溶液1mL于干洁的试管中,加入蒽酮试剂5mL混合之,于沸水浴中煮沸15 min,如果溶液变绿,即表明糖类存在 实验步骤5 将试管取出冷却,用分光光度计在波长625 nm处进行测定,并从标准曲线上查得滤液中的糖含量。蒸馏水作比较 处理 电导度 蒽酮反应 1h 2h 3h 1h 2h 3h 45 oC 0~2 oC 室温 蒸馏水 电导度测定数据 * * *
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