人类染色体组型探索.ppt

实验一 人类染色体组型分析 一、实验原理 组型 karyotype 是将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像. 通常以模式图的方式表示,它是通过对许多细胞染色体的测量取其平均值绘制而成的,代表了一物种染色体组型的特征.由于染色体是遗传物质单位——基因的载体,组型代表了种属的特征.所以组型分析对于探讨人类遗传病的机制等方面具有重要意义. 二、实验目的 掌握染色体组型分析的各种数据指标 学习染色体组型分析方法 制作人类染色体组的核型图片 三、染色体的特征 数目 （2n ？） 长度 （绝对长度、相对长度） 着丝粒位置 （M\SM\ST\T） 随体与次溢痕的数目、大小和位置 带型分析 四、应用意义 染色体组型分析——染色体水平上的表型 可确定物种的特征，确定种属亲缘关系 分析生物物种的变异和进化过程 识别单条染色体、基因定位 临床应用（染色体疾病、产前诊断） 每一个中期染色体均由两条染色单体构成，每一条染色单体由一个DNA分子螺旋而成。 两条染色单体互称为姐妹染色单体。两条染色单体通过一个着丝粒彼此连接。着丝粒将染色体分为两臂，长臂（q）和短臂（p）。 如何获得中期染色体? 染色体形态测量数据 2、人类染色体形态 3、人类的正常核型 4、人类染色体的带型 G-Banding Q-Banding Quinacrine R-Banding 正常男性— 46, XY 正常女性— 46, XX 四、实验器材 人染色体显微照片,剪刀,镊子,胶水. 五、本实验的步骤 1.同源染色体配对编号:按图片上的染色体大小,形态,着丝粒位置,随体有无,进行同源染色体配对,将染色体分为22对常染色体和一对性染色体.编号为1-22号,性染色体编号为23号. 2.分组:将大小,形态,着丝粒位置相近的染色体归为一组,一般分为A-G的7个组，每组3对染色体。 3.粘贴:在实验报告纸上划8条横线,用剪刀按编号将图片上的染色体分别剪下,分组排列粘贴在横线上.如A组排列1-3对染色体,C组排列6-12对染色体等.性染色体单独排列在一条线上. 各组染色体主要特征: Trisomy 21 47,XY,+21 – DownSyndrome Trisomy 18 47,XY,+18 – EdwardSyndrome Trisomy 13 47,XY,+13 – PatauSyndrome Klinefelter Syndrome 单色FISH 染色体着丝粒荧光 染色体端粒荧光 多色FISH的组型分析（24种染色） 作业:交一幅人类染色体组型分析图 * * 五、人类染色体及其制备方法 1、人类染色体的特征和类型 染色体的形态、结构特征 在细胞周期中，以细胞分裂 中期最为典型，称为中期 染色体。 I t 7－∞ 顶端着丝粒染色体 l st 3－7 近端着丝粒染色体 L sm 1.7－3 近中间着丝粒染色体 V m 1－1.7 中间着丝粒染色体 分裂后期形态 符 号 臂比 长/短 名 称 染色体的类型 中央着丝粒染色体 亚中着丝粒染色体 近端着丝粒染色体 核型（Karyotype） 将一个体细胞中全套染色体按一定方式排列起来，构成图像。 根据人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN），依据染色体的形态、大小和着丝粒的位置，将染色体分为七组： 核型（Karyotype）分析 组别 染色体编号 大小 着丝粒位置 A 1～3 最大 中、亚中 B 4、5 大 亚中 C 6～12+X 中 亚中　 D 13～15 中 近端 E 16～18 较小 中、亚中　 F 19、20 小 中 G 21、22 +Y， 最小 近端 人类23对染色体 5、细胞培养与染色体制备 正常人外周血或细胞 RPMI1640培养基+15%小牛血清 5ml 370C，培养68 hr 加秋水仙素，培养2～4 hr（抑制细胞分裂） 收集细胞 离心，去上清液（1000rpm/10 min） 低渗处理，0.075 M KCI，370C，25min 预固定，甲醇：冰醋酸 3：1 离心，去上清液（1000rpm/10 min） 重复固定三次 制片，染色，观察，照相，组型。 人体染色体显微照片 无 X染色体很象6号染色体，中着丝点。Y染色体很象21，22号染色体，但Y染色体无随体 23 性染色体 有 很短的末端着丝点 21-22 G 无 短的近中着丝点 19-20 F 无 较短的近中着丝点，16号更近于中部着丝点 16-18 E 有 中等大小，具末端着丝点 13-15 D 无 中等大小的近中部着丝点。其中6，7，8，11比9，10，12更近于中部着丝点 6-12 C 无 大型染色体，近中部着丝点，