第六章兽用基因工程生物制品的安全性课件.ppt

四、兽用的DNA疫苗的安全性 DNA疫苗是将免疫应答目的基因插入质粒载体而制备的生物制剂。将其导入动物体后通过宿主细胞表达系统表达抗原，进而诱生保护性免疫应答。 1. DNA疫苗简介 DNA 疫苗的给药途径包括：注射、液喷、基因枪、口服和皮内接种等。 DNA 疫苗的主要优点如下： 载体结构简单，分子克隆较易； 重组DNA分子稳定，可制成冻干疫苗，便于贮运 比传统疫苗更安全，使用过程中不需用佐剂。 将几种重组质粒简单组合便可制备成多价疫苗。 2 DNA疫苗的安全性问题 对DNA疫苗的主要担忧：重组DNA片段可能整合至宿主DNA而造成插入突变，进而可能致癌或致病；虽然目前发现整合危险性相当低，但缺乏灵敏有效的监测手段，难得获得准确和全面的数据。 对DNA疫苗使用的安全性还有一系列问题需阐明： 动物体内究竟是哪些细胞摄取DNA、在哪些细胞中表达、表达的持续期有多久？ DNA是否进入细胞核、能否复制、是否能整合？ 外源抗源长期表达能否导致有害的免疫病理反应？ 对DNA注射是否会导致产生对DNA的抗体？或引起自身免疫反应？ 减毒菌的转基因产品： 主要是活疫苗产品，通过转基因减毒菌的培养、收集培养物或离心收集菌体、加入保护剂后转入西林瓶、制备液体疫苗或冻干疫苗 要求生产过程严格GMP要求组织生产； 要求产品稳定性好、加入的保护剂安全有效，且没有引入有害物质； 要求生产和加工活动对转基因生物的影响类型为类型2； 因此，转基因活菌产品的安全性等同于转基因的减毒菌株。 第三节 兽用基因工程生物制品安全性评价 一、危害性分类标准和安全性评价标准 1. 危害性分类标准 第一类危害性：个体和群体危害性低，不可能引 起健康动物疾病； 第二类危害性：中度个体危害、有限群体危害， 可能引起动物疾病，正常情况下不会对人 造成严重危害，具备有效治疗和预防措施 第三类危害性：高度个体危害、低度群体危害， 能引起严重的人或动物疾病，但不会引起 个体间传播，有预防和治疗手段； 第四类危害性：高度个体和群体危害，能致病且 不可预防或治疗，可个体间及人畜间传播。 2. 安全性评价标准 第一类制品的安全性评价：评价的重点是生物体的分子特性及受体生物基因和缺失或增加基因的特性。 分子特性：受体的特性、缺失的特性、供体基因的 特性、重组体的特性、基础种子的特性 生物学特性：包括 受体、供体和基础种子的生物 学特性、安全等级及其检测方法 ● 第二类制品的安全性评价：评价的重点是缺失基因、疫苗生物和受体生物的分子特性和生物学特性。 分子特性：受体的特性、缺失的特性、基因缺失体 的特性、基础种子的分子特性； 生物学特性：包括受体和基础种子的生物学特性、 安全记录、遗传稳定性及潜在危害性。 3. 第三类制品的安全性评价 评价的重点是基因修饰的载体活疫苗的特性鉴定和对供体、受体及重组基础种子的分子和生物学特性的鉴定。 分子特性：包括 受体、供体、重组生物体和基础种子的分子特性和制备过程中的改变。 生物学特性：包括 受体、供体和基础种子的生物学特性，毒力、宿主特异性、遗传稳定性等资料。 4. 其他制品的安全性评价 其他动物用生物制品包括DNA疫苗、干扰素、生化制品等，可参照动物用或植物用转基因微生物的要求进行评价。 进口兽用基因工程生物制品评价重点，是以控制污染制品进口，防止外来动物疫病进入。评价对象既包括制品本身，也包括其研制和生产过程。 第四节 兽用基因工程生物制品安全管理 兽用基因工程生物制品的安全性问题可能出现在研发、生产、使用、转运和废弃物处理等各个环节中，其安全管理也应复盖上述的各个环节。 兽用基因工程活疫苗在环境释放后的分子特性、生物学特性及潜在危险性的表现可能更为明显。 兽用基因工程生物制品的安全性问题主要集中于对人类和动物健康和对环境潜在危害两个方面。 安全管理的目的是将其研发、生产、使用、转运和废弃物处理等各个环节中可能发生的危害降到最低程度，保障人类、动物和环境的安全。 一、国外的安全管理 随着兽医生物技术的发展，兽用基因工程生物制品安全性问题日益引起人们的重视，各国政府均制定和采取一系列生物安全控制的对策和措施。 1 法律法规体系 采取立法和条例的形式予以引导和管理。 美国：原则上是在现有法律、法规基础上由有关行政部门实施相关产品和过程的安全性管理，主要管理部门有农业部、卫生部和环保署。 欧盟：主要是法规、条例指导，各成员国再建立自己