第二章-紫外可见分光光度法-2分解.pptVIP

单一组份测量步骤 ①配制一系列标准浓度的标准液 ②测定物质的吸收光谱，选择最大吸收峰波长λmax 若一个物质有几个吸收峰，如何选择？ a:选择吸收峰较高（A值较大） b:并且其他物质没有吸收的波长 ③在选择的波长下进行定量分析 其方法有：吸光系数法、对照法、标准曲线法 [吸光系数法] 根据A=ELC只要已知ε或E1cm1%值，根据被测得吸光度，可求出被测物的浓度。 E值：从手册或文献中查处 [例] 维生素B12样品25.0mg用H2O溶成1000ml后，盛于1cm吸收池中，在361nm处测得吸收度为0.507 (已知E1cm1% = 207)，求样品中B12的含量。 [对照法] 同一物质，同台仪器 ，同一波长测定，故L、E相等 A标/ A样=c标/ c样 c样= c标A样/ A标 在同样条件下配制标准溶液和样品溶液，在选定波长处分别测量吸光度。 A标= Ec标L A样= Ec样L 缺点：易造成偶然误差，从统计学观点看误差很大。 标准曲线法 1. 方法 2. 标准曲线法优缺点: 3. 回归直线方程 吸收池厚度不变(同吸收池),入射光波长