生物制药技术-第三章-动物细胞工程制药(1,2,3,4,5)概述.pptx

第三章 动物细胞工程制药 --第一节，第二节，第三节，第四节，第五节 第一节概 述 人类认识细胞的历史不长，1665年英国物理学家Hooke，用自制的显微镜观察切成薄片的软木，发现了许多蜂窝状的小室，他把它们称为细胞(cell) ，实际上这只是死细胞留下的细胞壁。 不久，荷兰科学家Leeuwenhoek才真正首次观察到了活的细胞。1838年德国的植物学家 Schleiden和1839年，动物学家Schwann，在各自观察了动、植物组织后的报道中把细胞作为一切动、植物体的基本结构单位，从而创立了细胞学说。恩格斯把该学说列为19世纪自然科学的三大发现之一。 组织培养或细胞培养——将组织或细胞从机体取出，在体外模拟机体体内的生理条件进行培养，使之生存和生长，至今已有近百年的历史。1885年德国人Roux用生理盐水培养鸡胚组织，使之存活了数月之久；1897年Loeb证明从血液和结缔组织中分离到的细胞可以在血清和血浆中存活； 1903年Jolly观察到蝾螈细胞在体外可进行分裂。这些实验被认为是组织和细胞培养的早期萌芽实验。1907年Harrison成功地在凹玻片的淋巴液内无菌条件下培养了离体的蛙胚神经组织，并观察到神经细胞突起的生长过程，由此开创了现代细胞培养的新纪元。 90多年来，细胞培养工作己取得了巨大迸展。近年来随着细胞生物学、分子生物学、生物化学和基因工程学等一系列学科和技术的发展，原先的细胞培养技术已发展成为一门崭新的学科——细胞工程学(cell engineering或cytotechnology) 。尽管它还很年轻，但它已成为当今高技术——生物工程研究领域中不可缺少的一部分，并已在国民经济的许多部门，包括制药工业中发挥了巨大的作用。 细胞工程是以细胞为单位，按人们的意志，应用细胞生物学、分子生物学等理论和技术，有目的地进行精心设计，精心操作，使细胞的某些遗传特性发生改变，从而达到改良或产生新品种的目的，以及使细胞增加或重新获得产生某种特定产物的能力，从而在离体条件下进行大量培养、 增殖，并提取出对人类有用的产品。这是一门应用科学和工程技术，它包括真核细胞的基因重组、导入、扩增和表达的理论和技术，细胞融合的理论和技术，细胞器特别是细胞核移植的理论和技术，染色体改造的理论和技术，转基因动、植物的理论和技术，细胞大量培养的理论和技术，以及将有关产物提取纯化的理论和技术。 如上所述，细胞是一切动、植物生命体的基本组成单位。细胞虽小(直径10μm左右)，但却非常精密、复杂，并有着巨大的生产效率，可以生产出许许多多维持机体生命所必需的产物。因此很早以前人们就考虑到要很好地利用这个“加工厂”。1949年Enders及其同事发表了第一篇关于在培养细胞中生长病毒的报道，为以后采用细胞培养技术生产疫苗奠定了基础。随着基因工程的发展，人们渐渐认识到有许多基因产物不能在原核细胞内表达，它们需要经过真核细胞所特有的翻译后修饰，以及正确的切割、折叠后，才能具有与自然分子一样的功能和抗原性。 这就使动物细胞一跃成为一种重要的宿主细胞，用以生产各种各样的重要的生物制品，包括疫苗(如乙肝疫苗，狂犬病疫苗，脊髓灰质炎疫苗和乙脑疫茵等)、淋巴因子(如α、β和γ干扰素、白细胞介素1、2和6等)、纤维蛋白溶酶原激活剂[尿激酶原(prourokinase， pro- UK)和组织型纤溶酶原激活剂(tissue·type plasminogen activator， t-PA)等]、单克隆抗体、红细胞生成素(erythropoietin， EP())、第8因子、肿瘤坏死因于(tumor necrosis factor，TNF)、粒细胞克隆刺激因子( granulocyte colony sti日mlating factor， G-CSF)、上皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)及过氧化物歧化酶等。这些药品对临床诊断、治疗和预防，包括病毒、癌症、心血管病、血液病、内分泌病及贫血等疾病和外伤都有着重要意义。其中已有一些被批准用于临床，成为商品。据初步统计，目前全世界正在从事这些细胞产品的生产和研究的公司和机构近1 000家，1995年仅美国的产值就超过了上百亿美元，它已成为许多发达国家一个重要的新兴产业。 第二节 动物细胞的形态和生理特性 一、动物细胞的形态 动物细胞的结构较原核细胞复杂得多(图3一1)，而且已不是靠一个细胞包办一切生理活 动，各种细胞都有明确的分工。为了适应其功能的需要，细胞的形态也有了相应的变化，我们称这种变化为分化(或称特化)。如肌肉细胞成纺锤形，可起到收缩伸展的作用；神经细胞具有很长的分支，很多的纤维，以便接受和传递刺激；红细胞呈圆盘状，使与外界的接触面相对地增大，有利于和周围环境交换气体和在血管内流动；而上