分子生物学讨论课讨论题4详解.pptVIP

1.从/nuccore/网站中对该基因进行搜索，输入登录号：AK135903.1 预防医学1403班 小组成员：01 王璟 02 楚歆 03 宋娟 04 席玥 讨论题4 分子生物学第四次讨论 讨论题目： 已知目的基因的cDNA序列（GenBank登录号：AK135903.1），拟采用基因工程技术在哺乳动物细胞中表达该序列中的133-1941位核苷酸序列，请设计实验方案。 根据133-1941的序列，设计PCR引物 从cDNA中扩增该序列 得到扩增产物后将产物插入质粒 该质粒扩增后转染哺乳动物细胞，纯化后进行表达 1 2 3 4 我们的方案： 根据133-1941的序列，设计PCR引物 引物设计目的、原理及原则 1 搜索、设计引物 3 学习使用GenBank 2 根据原则筛选引物 4 引物设计的目的 目的是找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功，但遵循某些原则，则有助于引物的设计。 引物设计的原理 1、 择合适的靶序列：设计引物之前，必须分析待测靶序列的性质，选择高度保守、碱基分布均匀的区域进行引物设计。? 2、 长度：一般来