分子生物学实验常用工具酶总结详解.doc

现代分子生物学实验手册 工具酶 基因工程：在人工可以控制条件下，将基因剪切或重新组合，再导入另一生物体内，使这些基因在其中表达并遗传下去的一门技术。 核心：对基因进行人工切割、连接和重新组合，构建重组DNA。 工具酶：在基因工程的重组DNA过程中，所需要用到的酶的统称。 限制性内切酶（restriction endonuclease） 主要功能：对外源性的双链DNA进行切割、水解，不允许外源性DNA存在于细菌自身细胞内。 （这种酶能对在自身细胞内存在的DNA种类给予限制——限制性内切酶） 限制-修饰系统：合成限制性内切酶的细胞，其自身的DNA不受酶的切割，这是因为细菌细胞还会合成一种修饰酶，可以对自身DNA进行修饰，即改变DNA原来具有的可以被限制性内切酶识别的核酸顺序结构，从而不被限制性内切酶识别及切割、水解。 保护自身遗传物质稳定的机制。 限制性内切酶：从原核生物中发现的，约600种，可识别108种不同的特定DNA顺序。以内切方式水解核酸链中的磷酸二酯键，产生DNA片段的5’端为P，3’端为- OH。 命名：获得该酶的细菌属名的第一个字母（大写）+该菌种名的前两个字母(小写)+株系的字母（小写）或数字+罗马数字（同一株菌种不同内切酶的编号） 例： 细菌属名 细菌种名 菌株名称 限制酶名称 Arthrobacter luteus Alu