5.1 色谱法概述.ppt

* 第五章 色谱分析基础 第一节 色谱法概述 5.1.1 色谱法的特点、分类和作用 5.1.2 色谱基本参数与流出曲线的表征 5.1.3 色谱一般分离过程与基本关系式 Fundamental of chromatograph analysis Generalization of chromatograph analysis * 5.1.1 色谱法的特点、分类和作用 1.概述 混合物最有效的分离、分析方法。 俄国植物学家茨维特在1906年分离叶绿素， 色谱原型。 色谱法是一种分离技术。 混合物分离过程：试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配。 一相固定不动，称为固定相。 另一相是携带试样混合物流过固定相的流体(气体或液体)，称为流动相。 （动画） * 色谱法 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。 （动画） 与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。 两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础。 * 2.色谱法分类 (1)气相色谱：流动相为气体（称为载气）。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱。 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱。 * (2)液相色谱 流动相为液体（也称为淋洗液）。 按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。 离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。 * (3)其它色谱方法 薄层色谱和纸色谱： 比较简单的色谱方法。 凝胶色谱法：测聚合物分子量分布。 超临界流体色谱：CO2流动相。 高效毛细管电泳： 九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器。 * 色谱一般结构流程 色谱法分类图示 * 3.色谱法的特点 （1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体，手性异构体。 （2） 灵敏度高 可以检测出μg·g-1(10-6)级甚至ng·g-1(10-9)级的物质量。 （3） 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 （4） 应用范围广 气相色谱：沸点400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 不足之处： 被分离组分的定性较为困难。 * 5.1.2 色谱基本参数与流出曲线的表征 1.基线 无试样通过检测器时，检测到的信号即为基线。 2.保留值 （1）时间表示的保留值 保留时间(tR)：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间； （动画） 死时间(tM)：不与固定相作用的气体(如空气)的保留时间； 调整保留时间（tR ＇）：tR＇= tR－tM * （2）用体积表示的保留值 保留体积（VR）： VR = tR×F0 F0为柱出口处的载气流量， 单位：m L / min。 死体积（VM）： VM = tM ×F0 调整保留体积(VR＇)： V R＇ = VR －VM （动画） * 3. 相对保留值r21 组分2与组分1调整保留值之比： r21 = t′R2 / t′R1= V′R2 / V′R1 相对保留值只与柱温和固定相性质有关，与其他色谱操作条件无关，它表示了固定相对这两种组分的选择性。 * 4. 区域宽度 衡量色谱峰宽度的参数，三种表示方法： （1）标准偏差(?)：即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。 （2）半峰宽(Y1/2)：色谱峰高一半处的宽度 Y1/2 =2.354 ? 。 （3）峰底宽(Wb)：Wb=4 ? 。 * 5. 色谱流出曲线的数学描述 色谱峰为正态分布时，色谱流出曲线上的浓度与时间的关系为： 当色谱峰为非正态分布时，可按正态分布函数加指数衰减函数构建关系式。 * 5.1.3 色谱一般分离过程与基本关系式 填充柱色谱: 气固(液固)色谱和气液(液液)色谱，两者的分离机理不同。 气固色谱的固定相：多孔性的固