发酵液的预处理详解.ppt

发酵液（或培养液）的预处理 （三）高价无机离子的去除 Ga2+：加入草酸和草酸盐，生成草酸钙；加入磷酸盐，生成磷酸钙 Mg2+：加入草酸（沉淀不完全）；加入磷酸盐，生成磷酸镁；三聚磷酸钠（Na5P3O10），生成可溶性络合物 Fe3+：加入黄血盐，生成普鲁士兰沉淀 1.过滤介质 使滤液通过，截留固体颗粒并支撑滤饼的材料。要求其具有多孔性、耐腐蚀性及足够的机械强度。 工业常用的过滤介质：织物介质、多孔性固体、粒状介质。 无定形颗粒：无烟煤、砂、颗粒活性炭、铁矿砂等 成形颗粒：烧结金属、烧结塑料以及用合成树脂粘结的硅砂、塑料颗粒等，做成圆筒形或板状。 非金属织补棉：化学纤维、玻璃纤维织品、长纤维滤布、短纤维滤布。 金属织布：不锈钢丝或铁丝等的织布。 无纺品：纸、毡、石棉板、合成纤维无纺布等。 2.滤饼的压缩性及助滤剂 （1）滤饼的压缩性：受力不变形的颗粒形成的滤饼称不可压缩性滤饼，反之则称为可压缩性滤饼。发酵液悬浮颗粒属于可压缩性颗粒 。 （2）助滤剂：减小过滤阻力、提高滤饼的刚性和孔隙率的惰性材料。 （3）过滤推动力：过滤介质两侧的压力差。 （4）过滤速率：单位时间内通过的滤液体积。 3.过滤方式分类： 常压过滤、加压过滤、减压过滤、离心过滤。 滤饼阻力与滤饼干重之间的关系 Rc表示滤饼的阻力 A为过滤面积m2 菌种对过滤速度影响很大。 真菌：菌丝粗大，容易过滤，不需特殊处理。滤渣呈紧密饼状物，易从滤布上刮下，可采用鼓式真空过滤机过滤。 放线菌：菌丝细而分枝，交织成网络状，还含有很多多糖类物质，粘性强，重量比阻r B值高，过滤困难，一般需经预处理，以凝固蛋白质等胶体。 细菌：菌体更细小，过滤十分困难，如不用絮凝等方法预处理发酵液，往往难以采用常规过滤的设备来完成过滤操作。 1、菌种 培养基的组成对过滤速度影响也很大。 黄豆粉、花生饼作氮源、淀粉作碳源会使过滤困难。 举例：a 、在链霉素发酵液的培养基中，加以黄豆粉代替玉米浆，则比阻值增大0.6—1.0倍。 b、 在青霉素发酵的培养基中，加入酵母蛋白，rB值也提高很多。 此外，发酵后期加消沫油或剩余大量末用完的培养基都会使过滤困难。 2、培养基 正确选择发酵终了时间对过滤影响很大。 在菌丝自溶前必须放罐，因为细胞自溶后的分解产物很难过滤。 有时延长发酵周期虽能使发酵单位有所提高，但严重影响发酵液质量，使色素和胶状杂质增多、过滤困难，最终造成成品质量降低。 3、发酵时间 （三）、改善过滤性能的方法 对于难过滤的发酵液，必须设法改善过滤性能、降低滤饼的比阻值，以提高过滤速度。 改善过滤性能的方法： 1、预处理发酵液。等电点，蛋白质变性、吸附以及凝聚和絮凝等方法。 2、加入助滤剂，直接在发酵液中形成填充一凝固剂。 3、酶解作用 助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，能使滤饼疏松，滤速增大。 常用的助滤剂：硅酸盐粉末(硅藻土）、纸浆、珠光石 (即珍珠岩，成分为二氧化硅）。 要求：助滤剂必须不吸附或很少吸附生化物质。 1、加入助滤剂 加入方式： 1、在滤布上预先铺一层助滤剂(1—2mm)，采用此种方法，会使滤速降低，但滤液透明度很快增加。 2、直接加入发酵液中。助滤剂用量若等于悬浮液中固体含量时，滤速最快。 反应剂相互作用，或和溶解性盐发生反应，生成沉淀。能防止菌丝体粘结，使菌丝具有块状结构。 沉淀本身即可作为助滤剂，并且还能使胶状物和悬浮物凝固。 正确选择反应剂和反应条件，能使过滤速度提高3—10倍。 2、加入反应剂 举例： 新生霉素发酵液中加入氯化钙和磷酸钠，生成的磷酸钙可作为填充——凝固剂。一方面作为助滤剂，另一方面还可使某些蛋白质凝固。 环丝氨酸发酵液用氧化钙和磷酸处理，生成的磷酸钙沉淀，熊使悬浮物凝固。多余的磷酸根离子，还能除去钙、镁离子。 如果发酵液中有不溶解的多糖存在，则最好用酶将它转化为单糖，以提高过滤速度。 例如：万古霉素用淀粉作培养基，加入淀粉酶后，能使过滤速度加快。 3、采用酶制剂分解黏性物质 * * 预处理和固液分离的目的： 1、分离细胞、菌体和其它悬浮颗粒(细胞碎片、核酸和蛋白质的沉淀物)。 2、除去部分可溶性杂质。 3、