Mcl1与IAPs家族蛋白介导肝癌细胞抗凋亡作用及其分子机制的研究.pdf

第一部分摘要 Mc卜1和l APs家族蛋白介导肝癌细胞抗凋亡作用及 其分子机制的研究 第一部分Mc I-1在肝癌靶向治疗中的作用及其分子机制研 究 研究生：李功权 导师：张水军 郑州大学第一附属医院肝胆胰外科 郑州450052 摘要 凋亡是程序性细胞死亡， 细胞凋亡主要通过内源性、外源性2个信号传导 通路。许多研究证明，肝细胞肝癌(HCC)细胞内源性凋亡缺陷是导致化疗失 败的原因之一。 Bcl一2家族蛋白是控制细胞生存与死亡的关键蛋白，在调节细 cellleukemin一 胞凋亡信号中发挥重要作用。髓细胞白血病基因-1(myeloid 于各种刺激应答快，其表达在转录、转录后以及蛋白等水平受多种信号的严密 调控，以及由于Mcl一1在肝癌等多种恶性肿瘤中普遍高表达，Mcl—1一直是肿瘤 分子靶向治疗研究的热点。 ABT一737、 血病和实体肿瘤(小细胞肺癌等)有很好的治疗作用，已经进行I／II期临床 T 第一部分摘要 高表达Mcl-1的肿瘤细胞和组织对这个化合物诱导的凋亡抵制，这成为阻碍 ABT一737、ABT一263(Navitoclax)进入临床应用的一个主要问题。有研究证 治疗的敏感性。 去甲斑蝥素(NCTD)是一个小分子抗肿瘤药物，它衍生于传统中药斑蝥。 一些研究显示，NCTD的抗肿瘤作用可能和Bcl-2家族成员的作用相关。在前期 研究中，我们注意至IJNCTD极大地抑制了Mcl—l在HCC细胞中的表达。 阿斯匹林(乙酰水杨酸)是一种常见的非类固醇抗炎药物(NSAID)，它具 有退热、镇痛和抗炎作用。和其它NSAIDs一样，阿斯匹林在多种肿瘤细胞中显 示了强烈的抗癌作用。近期研究显示，阿斯匹林在结直肠癌、口腔鳞癌、宫 颈癌和白血病细胞中的抗肿瘤作用和下调Mcl-1水平有关。然而，阿斯匹林能 没有被研究。 瘤效果，并研究其具体作用的分子机制。 目 的 阿斯匹林对HCC细胞的作用效果，研究2种小分子BH3模拟物单药、联合NCTD和 阿斯匹林的抗癌活性及其作用的分子机制。 方法 测、流式细胞、westernblotting等方法，观察NCTD和阿斯匹林分别对2种小 II 第一部分摘要 机制。 结果 1．1 MNCTD p M 部分抑制了Mcl-1的表达，30、60|lNCTD完全抑制了Mcl一1在4株肝癌细 uM 依赖蛋白降解所致。30 mRNA水平。 RT-PCR检测发现，NCTD极大减少了Mcl-1 1．2阿斯匹林抑制肝癌细胞中Mcl-1的表达。2．5、5、10IIlM阿斯匹林处理 林作用于细胞48h，部分抑制了Mcl-1的表达，10IIlM阿斯匹林完全抑制了 Mcl-1的表达。 2．1 pM HepG2细胞对ABT-737不敏感。但是，在NCTD联合卜3ABT一737极大地抑 理细胞48小时对诱导细胞凋亡的作用很小。联合处理细胞则引起了2株细胞 中大量的细胞凋亡。 2．2阿斯匹林增强Navito