叶酸靶向化疗详解.docxVIP

叶酸介导的大分子抗癌治疗药物的传递摘要：叶酸受体是肿瘤特异性药物传递的有效靶点，主要原因是：（1）它可以调节许多人类癌细胞，包括卵巢、脑、肾、乳腺、髓细胞和肺的恶性肿瘤细胞，（2）在正常组织中被叶酸受体识别，由于其在极化上皮细胞的顶端（外面）膜的位置，可以严重限制其在正常组织中的表达，（3）叶酸受体密度随着癌症恶化的阶段/分级增加。因此，最难用经典方法治疗的癌症可能在叶酸靶向治疗中是最容易的。利用这些叶酸受体表达的特点，叶酸已被链接到两个低分子量和高分子配合物上，用于靶向分子靶向恶性细胞的研究。叶酸与大分子的结合，在体外几乎所有的情况下都能增强其对叶酸受体表达癌细胞的传递作用。然而，叶酸介导的分子靶向在体内只产生了混合的结果，很大程度上是因为实体肿瘤分子的渗透问题。尽管如此，叶酸靶向性显著改善了一种以高分子为基础的治疗的例子也确实存在，这导致在许多情况下，完全治愈了确定的肿瘤细胞。这篇综述讲述了一个简短的叶酸靶向大分子疗法的机械背景，然后总结了各大技术在应用中的优缺点。1.介绍蛋白质、基因治疗载体、脂质体包裹药物、核酸适配体、反义寡核苷酸、药物衍生的生物降解的聚合物对癌症治疗都显示极大的潜力，主要是因为其特异性的改进、作用时间的延长、或更传统的化疗药物效力的增强。然而，不同于低分子量的药物，大分子药物往往会遇到显着的渗透性障碍，从而限制上述理想的性能的实现。因此，尽管肿瘤的选择性往往是由于肿瘤的高度差形成的血管和随之而来的被动积累的大分子在恶性肿块{称为增强渗透和滞留（EPR）效应}，但肿瘤细胞膜仍然可以构成一个强大的屏障，这些大分子必须进入他们的靶细胞，从而导致细胞死亡。如果肿瘤淋巴管引流不发达，瘤内压力的增加也可以限制大分子药物在肿瘤部位深部的药物传递。为了克服这些限制，许多人采用已经采用癌细胞特异性配体作为靶向部分，在肿瘤组织提高大分子传递和治疗。这篇综述的目的是总结在开发维生素、叶酸作为配体的选择性靶向和交付的大分子药物进入肿瘤细胞的进展。在几种代谢途径中，叶酸是一种碳转移反应所需的维生素，因为叶酸在核苷酸的生物合成中是必不可少的，在增殖细胞中消耗大量的维生素。正常细胞跨膜运输的生理叶酸使用两种膜相关的蛋白质:还原叶酸载体或叶酸受体（FR）。研究发现前者在几乎所有细胞中负责生理叶酸摄取的主要途径。后者主要出现在极化上皮细胞和活化的巨噬细胞中，并且优先结合和内化通过氧化叶酸受体介导的内吞作用。虽然低浓度的还原叶酸载体可能足以供应大部分正常细胞的叶酸需求，但FR经常在肿瘤细胞中高表达，当供应有限时，使恶性细胞成功地争夺维生素。 尽管FR在许多癌细胞中的过度表达可以很明显地识别受体的一个潜在靶点和抗体介导的癌症的治疗，但FR也可以进一步作为一个合格的肿瘤特异性的靶点，因为它通常只有在恶性转化后，静脉注射才有用。那是因为FR选择性地表达在某些上皮细胞顶膜的表面（即，膜面体腔），它对血生试剂来说不可用，因此，阻碍了FR-介导的治疗药物在等离子体中的传递。然而，在上皮细胞转化时，细胞极性丧失，FR成为靶向药物进入循环。这可能是因为这种双重机制的肿瘤特异性，受体的天然配体、叶酸已成为一种靶向附着药物传递到癌细胞中的有效分子。叶酸已经因其高亲和力、（KD～10?10M），免疫原性低、易修改、体积小（分子量：441.4），在储存过程中稳定性好、兼容多种有机和水性溶剂、成本低、随时可用等优点，吸引力越来越强。到目前为止，许多化学和生物治疗药物已成功与叶酸连接，其中大部分在体内和体外都表现出显着增强了FR-阳性肿瘤细胞的传递。在下面的叶酸靶向高分子抗癌药物的总结中，我们不仅讲述大分子靶向识别领域中的成功事例，而且指出了只有超越之前的各种靶向叶酸的应用才可以充分发挥其潜力所存在的缺陷。2.基本知识2.1.叶酸受体的结构与功能人类FR家族(Mr～38 kDa) 包括其三个特征的亚型（FR-α、FR-β和γ/γ′），他们的氨基酸序列70–80%相同，但表达模式不同。FR-α 和FR-β 由于其附着的糖基磷脂酰肌醇（GPI）膜锚，都是膜相关蛋白。然而，FR-α区别于FR-β 的是其对循环叶酸辅酶、(6S)-5-甲基四氢叶酸（5-CH3H4叶酸）具有高亲和力、也可通过减少叶酸辅酶的相对定向来区分。FR-α也可以高亲和力（KD～0.1 nm）与叶酸和生理叶酸结合，亲和力明显高于FR-β（KD～1 nm）。FR -γ和截短形式的蛋白FR -γ′缺乏GPI锚，并且在人类FR可溶性形式中几乎检测不到组成型分泌的数量。分泌的FR -γ与叶酸的结合亲和力据报道是～0.4 nm 。最近，一个基因编码了一种可能的受体的第四亚型基因（FR -δ），并且在人类基因组的未知区域被鉴定。然而，FR -δ无论在成人还是胎儿组织中的表达分析表明，并没有可检测的蛋白质水平，