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第三章 工业发酵培养基 第一节 工业发酵培养基的成分 第二节 工业发酵培养基的类型和配方设计 第三节 影响培养基质量的因素 培养基：广义上讲培养基是指一切可供微生物细胞生长 繁殖所需的一组营养物质和原料。同时培养基也为微生物培养提供除营养外的其它所必须的条件。 发酵培养基的作用： 第一节 工业发酵培养基的成分 一、碳源 作用 提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成分； 提供合成目的产物所必须的碳成分。 来源 糖类、油脂、有机酸、正烷烃 2、油和脂肪 油和脂肪也能被许多微生物作为碳源和能源。 这些微生物都具有比较活跃的脂肪酶，在脂肪酶的作用下，油或脂肪被水解为甘油和脂肪酸，在溶解氧的参与下，进一步氧化成CO2和H2O，并释放出大量的能量。 当微生物利用脂肪作为碳源时，要供给比糖代谢更多的氧，不然大量的脂肪酸和代谢中的有机酸会积累，从而引起pH的下降，并影响微生物酶系统的作用。 常用豆油、菜油、葵花籽油、猪油、鱼油、棉籽油等。 3、有机酸 一些微生物对多种有机酸（如乳酸、柠檬酸、乙酸等）有很强的氧化能力，可以有机酸或有机酸盐作为碳源。 有机酸的利用常会使pH上升，尤其是有机酸盐氧化时，常伴随着碱性物质的产生，使pH进一步上升。 如以醋酸盐为碳源时，反应如下： CH3COONa + 2O2 ? 2CO2 + H2O + NaOH 4、烃和醇类 随着石油工业的发展，微生物工业的碳源也有所扩大。 正烷烃（一般指从石油裂解中得到的14-18碳的直链烷烃混合物）已用于有机酸、氨基酸、维生素、抗生素和酶制剂的工业发酵中。 石油工业的发展促使乙醇产量的增加，乙醇代粮发酵的工艺发展也十分迅速，自然界中能同化乙醇的微生物和能同化糖质的微生物一样普遍，种类也相当多，乙醇作碳源其菌体得率比葡萄糖作碳源还高，因而乙醇已成功地应用于发酵工业的许多领域中，如利用乙醇生产单细胞蛋白 二、氮源 1、无机氮源 种类：氨盐、硝酸盐和氨水。 特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利用的氮源。但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化如： (NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4 NaNO3 + 4H2 → NH3 + 2H2O + NaOH 2、有机氮源 硫酸镁 Mg 2+是许多重要酶（如己糖磷酸化酶、异柠檬酸脱氢酶、羧化酶等）的激活剂 镁离子能提高一些氨基糖苷类抗生素产生菌对自身所产的抗生素的耐受能力，如卡那霉素、链霉素、新生霉素等产生菌。 硫存在于细胞的蛋白质中，是含硫氨基酸的组成成分 硫是构成一些酶的活性基 硫酸镁加入培养基中，在碱性条件下会形成氢氧化镁沉淀，配料时要注意。 四、生长因子、前体和产物促进剂 2、前体 3、产物促进剂 五、水 第二节 工业发酵培养基的类型和配方设计 一、培养基的类型 1、按纯度分 合成培养基 : 原料其化学成分明确、稳定 适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律。 原料来源丰富(大多为农副产品)、价格低廉、适于工业 化生产。 天然培养基: 采用天然原料 培养基营养单一，价格较高，不适合用于大规模工业生产 原料质量等方面不加控制会影响生产稳定性 2、按状态分 固体培养基 :适合于菌种和孢子的培养和保存，也广泛应用于有子实体的真菌类，如香菇、白木耳等的生产。 半固体培养基:即在配好的液体培养基中加入少量的琼脂，一般用量为0.5%～0.8% ,主要用于微生物的鉴定。 液体培养基:80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性 的营养成分，是发酵工业大规模使用的培养基。 3、按用途（从发酵生产应用考虑）分 孢子（斜面）培养基 种子培养基 发酵培养基 孢子培养基 要求：能使菌体生长快，产生孢子数量大、质量好，且不会引起菌种变异。 特点 C、N源不宜多，否则只长菌丝，少长或不长孢子； 无机盐浓度要适当控制，否则会影响孢子的颜色和孢子量。 常用孢子培养基： 麸皮培养基 小米培养基 大米培养基 玉米碎屑培养基 用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制的琼脂斜面培养基。 大米和小米常用作霉菌孢子培养基，因为它们含氮量少、疏松、表面积大，是良好的孢子培养基。 种子培养基 供孢子发芽、生长和菌体繁殖的培养基。 要求 营养丰富、完全，氮和维生素的含量高些； 培养基中加入一些易于吸收利用的快C、N源，便于孢子发芽生长，保证球形； pH要稳定； 最后一级尽可能接近发酵培养基，常加入少量发酵合成期才大量需要的物质。 发酵培养基 目的：使接种菌丝生长并能高效表达，获得高的发酵产量，同时组分尽可能单一，以保证高的得率。 要求 营养丰富完全，有利于产物合成； 不能大量加入快C、快N源，应和慢C、N源相结合； 在产物分泌期间，pH 稳定； 加入适量合成所需的物质，如