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人工制备抗体 多克隆抗体单克隆抗体基因工程抗体 人工抗体主要包括： 一、多克隆抗体 概念：以相应抗原免疫动物获得抗血清，通过接种动物所获得的免疫血清或抗血清是多种抗体的混合物，简称多抗。 多克隆抗体的应用： 1、用于抗原物质的鉴别、定位、分析和提纯 2、作为疾病的诊断、检疫试剂 3、作为人和动物某些疾病的治疗制剂 二、单克隆抗体 概念：1975年，Kohler和Milstein在自然杂交基础上创建杂交瘤技术，其产生的抗体只针对单一抗原决定簇，简称单抗。 单抗制备过程示意图 单克隆抗体的特点： 高特异性 高均质性 单克隆抗体的应用： 1、在血清学技术方面, 2、在免疫学基础研究方面, 3、在抗原纯化方面, 4、在肿瘤治疗方面，如生物导弹, 5、用于制备抗独特型抗体疫苗。 三、基因工程抗体 概念：又称重组抗体，利用基因工程技术制备抗体分子，这是分子水平的抗体。 基因工程抗体的优势： 去除或减少无关结构，保留 或增加天然抗体特异性和生 物学活性。 基因工程抗体包括： （一）改造鼠源性抗体 （二）噬菌体抗体 （三）胞内抗体 （一）改造鼠源性抗体 1.人-鼠嵌合抗体 2.改型抗体或人源化抗体 3.小分子抗体 1.人-鼠嵌合抗体 是指在同 一抗体分子 中含有不同 种属来源抗 体分子片段 的抗体。 人-鼠嵌合抗体的特点： 1.保留了鼠源单抗的特异性和亲和力； 2. 其人源Fc 段能有效介导生物学效应功能； 3.能自由地选择抗体，并有效地利用不同的生物学特点及理化特性； 4.可以容许插入不同的鼠单克隆抗体的可变区，缩短操作和研制周期；操作相对简单。 2.改型抗体或人源化抗体 概念：指利用基因工程技术，将鼠单抗V区中互补性决定区（CDR）序列取代人源抗体CDR序列，重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持人抗体亲和力的CDR移植抗体。 改型抗体或人源化抗体的特点： 保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利应用于人体。 3.小分子抗体 概念：是指由Fab和Fv组成的抗体片段。 小分子抗体的优点： a.仅含V区结构，免疫原性较弱， b.分子量小，易透过血管壁，可有效克服肿瘤灶组织对抗体的生理阻抗， c.无Fc段，不与非靶细胞的FcR结合，易渗透至病灶局部， d.有利于作为导向药物的载体。 小分子抗体的局限性： 与靶细胞表面抗原的结合力较弱，半寿期短，易从血液中被清除，从而影响到达肿瘤局部的抗体浓度。 小分子抗体的类型： （1）Fcb片段， （2）单域抗体， （3）Fv片段， （4）单链抗体（ScFc）， （5）最小识别单位（MRU）， （6）双价小分子抗体（diabody）， （7）双特异性小分子抗体， （8）微抗体（minibody）。 （二）噬菌体抗体 概念：是将克隆的人抗体V区基因与一种丝状噬菌体DNA上的基因Ⅲ或基因Ⅷ精确连接，转染细菌后在其膜表面表达Fab段--噬菌体外壳蛋白的融合蛋白。 噬菌体抗体的优点： （1）无须免疫，可直接从非免疫动物抗体库中筛选出特异性抗体， （2）可供产生针对多种特异性抗原的人源抗体，以克服难以建立的人-人杂交瘤的困难， （3）细菌增殖快，培养成本低，适合大规模生产，为临床上大量应用抗体提供了可能性。 （三）胞内抗体 概念：指借助基因工程手段，获得仅在细胞内表达并仅作用于胞内靶分子的抗体或其片段，多为ScFc。 胞内抗体的特点： 可特异性作用于胞内靶分子，从而发挥特定的生物学效应。 Thank you ！