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产品及特点 基因的定点突变是重要的分子生物学技术，广泛用于载体构建、基因改造、蛋白质功能研究等领域。 本产品具有下列特点： 直接使用质粒DNA作为模板，免去了制备单链DNA的步骤。 。 一管式，全部在一个优化的缓冲体系中完成，非常简单。 。L 无 高保真酶B型 无 10 uL 5×高保真酶Buffer A型 100 uL 无 5×高保真酶Buffer B型 无 100 uL dNTP（2.5 mM each）使用手册 1份 1份 保存, 。 一、 引物设计及注意事项 用于特定基因突变的引物必须用户单独设计，请参考如下一些基本原则进行设计。 共需设计两条完全互补的一对引物，它们覆盖要扩增的突变区位点，突变位点最好放在引物的中心。可以先集中设计一条，然后就可得互补的另一条引物。 引物的长度通常为25-45个碱基。引物中突变位点任何一侧都必需满足Tm 大于45的条件，Tm计算方式为Tm 4× GC碱基数 ＋2× AT碱基数 。例如引物agtcaggccaattcgAAGcagtcgaattgccaag就达到此标准，它的突变位点AAG所放位置使左侧Tm＝46；右侧Tm＝48，均大于45。 尽量把引物的GC含量控制在40％-60％，结尾的1-3个碱基最好是G或C。 尽量使引物不要产生非常稳定的二级结构和引物二聚体。 最好使用经过PAGE纯化的引物或更高纯度的引物。 二、待突变模板质粒的选择