实验9.2基因组DNA提取和PCR扩增课件.pptVIP

PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 50℃ 72℃ Taq Taq Taq Taq PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 72℃ 第2轮结束 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 模板DNA 第1轮扩增 第2轮扩增 第3轮扩增 第4轮扩增 第5轮扩增 第6轮扩增 (c) (b) 引物2 5’ 3’ 3’ 3’ 5’ 5’ (d) 新引物 5’ 3’ 靶DNA的扩增 (a) 5’ 3’ 引物1 3’ 5’ 3’ 5’ 引物2互补链 引物1互补链 单位长度的链 不同长度的链 5’ 3’ 3’ 5’ 引物1互补链 引物2互补链 目的片段（不同长度的链未示出） 聚合酶链式反应示意图 (e) (f) (g) PCR的主要用途 （一）目的基因的克隆 PCR技术是迅速获得一定量的目的基因以用于基因克隆的有效方法之一。主要采用的方法有： 与反转录反应相结合，直接从组织和细胞的mRNA 获得已知目的基因片段； 利用特异性引物以cDNA或基因组DNA为模板，获得已知的目的基因； 利用简并引物从cDNA文库或基因组文库中获得具有同源性的DNA片段； 利用随机引物从cDNA文库或基因组文库中随机获得目的基因。 （二）基因的体外突变 采用随意设计的引物，在体外对基因进行嵌合、缺失、点突变等改造。 （三）