实验二 细菌的简单染色与革兰氏染色 一、目的要求 1、巩固显微镜的使用方法; 2、掌握细菌的简单染色和革兰氏染色的原 理和方法。 二、基本原理 革 兰 氏 染 色 用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。 ? 碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美兰、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等)使其着色。 ? 酸性染料的离子带负电荷,能与带正电荷的物质结合。当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时,细菌所带正电荷增加,因此易被伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料着色。 ? 中性染料是前两者的结合物又称复合染料,如伊红美兰、伊红天青等。 简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态,简单染色不能辨别细菌细胞的构造。 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。 革兰氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较 成分 占细胞壁干重的% 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌
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