孙平动物细胞培养和核移植技术.ppt

2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 学习目标： 简述动物细胞培养的过程、条件及应用 简述通过动物细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 皮肤烧伤，如果创伤面积很小（不超过硬币），只要保持清洁，甚至深度烧伤也能痊愈。对大面积烧伤的病人来说，常常需要自体移植。但是自体移植皮肤有限，他人皮肤来源不足，而且会产生排斥反应。 如何才能获得大量的自体健康皮肤呢？ “人耳鼠”再出风头 2001年度报告月刊，一只特别的活老鼠在北京引起轰动——这是有着一对红眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的小白鼠。值得一提的是，这只小白鼠的背上，竟长着一只几乎与身体一般大小的“人耳”。这只老鼠背上的“人耳”是由上海市第九人民医院副院长、整复外科主任曹谊林教授利用组织工程技术复制出来的。 在京为期数天的展出，尽管门票高达20元，但还是有将近20万人，心甘情愿地掏钱一睹“人耳鼠”的风采。 长“人耳”的老鼠亮相京城，透露了一条信息——随着人类生命奥秘的揭晓，有朝一日人体就会像一辆汽车一样，哪个零件坏了，可再买一个新的换上。 3、动物细胞的培养过程 学习目标： 简述动物细胞培养的过程、条件及应用 简述通过动物细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 5、动物体细胞核移植的过程 讨论3、你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 讨论1、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 讨论2、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？ 1.成功率低； 2.克隆动物存在健康问题：许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等； 3.对克隆动物视频的安全问题也有争议。 例题：世界上第一只克隆绵羊“多利”的培育程序如图所示，请据图回答：（1）写出图中a、b所指的细胞工程名称： a ；b （2）实施细胞工程a时，所需的受体细胞大多采用动物卵母细胞的原因是 （3）“多利”面部的毛色是 。请根据遗传学原理说明判断依据： （4）继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证明动物细胞核也具有 。（5）请试举一例，说明克隆绵羊培育成功的实际意义。 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞 去核 供体细胞（供核） 细胞培养 体细胞 卵母细胞 （减Ⅱ中期：供质） 去核 无核卵母细胞 （显微注射法） 细胞融合 重组细胞 早期胚胎 胚胎移植 代孕母体 克隆动物 分娩 激活 卵裂 细胞膜的 流动性 (电脉冲等） （与供体动物遗传物质 基本相同的个体） 原因：减Ⅱ中期的卵母细胞体积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营养条件） 5、动物体细胞核移植的过程 供体细胞（供核） 动物细胞培养 体细胞 卵母细胞 （减Ⅱ中期：供质） 去核 去核卵母细胞 重组细胞 核移植技术 （显微注射法） 细胞融合 细胞膜的流动性 激活卵裂 重组胚胎 （电脉冲等） 代孕母体子宫内 胚胎移植 克隆动物 妊娠、分娩 （与供体动物遗传物质基本相同的个体） 原因：减Ⅱ中期的卵母细胞体积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营养条件 参考答案：不是。原因如下：克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，但细胞质内线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 此外，若克隆动物和核供体动物生活的环境也不会完全相同，即便它们的遗传物质完全相同，最后表现的性状也不尽相同。 提示：为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。 提示：培养的动物细胞一般当传代至10～50代时，部分细胞核可能会发生变化，其遗传物质可能会突变，在体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞。 思考： 1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？为什么用MⅡ中期卵母细胞做受体细胞？ 原因：①细胞体积大,易于操作; ②含有促进细胞核全能性表达的物质和 营养条件。 2.通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？ 诱导方法：物理或化学方法激活受体细胞，完成细胞分裂 和发育进程。 3、该过程用到的技术手段： 核移植技术、动物细胞培养、早期胚胎培养和胚胎移植、动物细胞融合。 体细胞核移植技术的应用前景 1.加速家畜遗传改良