第四章 芳香烃及其代谢产物的测4-5节定.pptVIP

尿中对氨基苯酚的测定 3 注意事项 （1）采样前要了解受检查者是否服药，并记录。 （2）对氨基酚的氨基重氮化后与盐酸萘乙二胺显色的深度与酸度有关，酸度应控制在0.05 mol/L为宜。 （3）显色慢且不稳定，因此要注意保温反应时间并在30 min内测定。 尿中对氨基苯酚的测定 （二）高效液相色谱法 1 原理 尿样加盐酸加热水解后，在酸性条件下用二乙提取，除去部分干扰物，然后在中性条件下用二乙提取尿样中对氨基酚，用高效液相色谱法测定。保留时间定性，峰高、峰面积定性。 尿中对氨基苯酚的测定 2 样品处理和测定 取2 mL尿样于25 mL试管中，加1 mL水和1 mL盐酸，摇匀、加盖放在沸水浴中加热1 h，冷却至室温，加水补足体积4 mL，二乙萃掉干扰物，水相中加入4 g磷酸氢二钾，二乙萃取，取10 μL萃取物上清液进HPLC。 尿中对氨基苯酚的测定 注意事项： 1 采样后尽早加酸，低温保存。 2 尿中对氨基酚部分以结合太存在，因此需加酸水解。 3 注意二次萃取的使用，为了除去干扰物。 4 用缓冲溶液条件pH值，方便，简单。 第二节 硝基苯 一 理化特性 硝基苯（nitrobenzene）为无色或淡黄色具苦杏仁味的油状液体。见光颜色变深。微溶于水，易溶于乙醇、苯、乙醚及其他有机溶剂。 硝基苯的体内代谢产物为对硝基酚（p-nitrophenol, PNP）为白色或黄色片状晶体，有强还原性，易被氧化，遇光和暴露在空气中可变为灰褐色。稍溶于水，易溶于乙醇，乙醚和碱液。 溶于苛性碱和碱金属的碳酸盐溶液后呈黄色。对硝基酚还是一种酸碱指示剂，其水溶液颜色随pH改变而改变。 二 代谢和生物检测指标 硝基苯主要经呼吸道，皮肤，消化道吸收。 反复接触可引起肝、肾损伤及贫血，饮酒可增强其毒作用。 在体内大部分转化为对氨基苯酚和间位或对位硝基酚， 对硝基、氨基苯酚可与体内葡萄糖醛酸和硫酸结合经尿排出，少量以原形，二氧化碳和微量苯胺形式由肺缓慢排出。 代谢和生物检测指标 硝基苯中毒主要产生高铁血红蛋白症，临床表现为一系列神经系统的症状，有时出现溶血性贫血和中毒性肝损害。 对硝基酚和对氨基酚常作为生物监测指标。 三 样品采集和保存 1 尿样 用聚乙烯塑料瓶收集接触者班后尿，如果用邻甲酚分光光度法检测对硝基酚，则100 mL加3 d甲醛，保存。如用高效液相色谱测定，则100 mL加3-4 d盐酸，保存。 2 脏器 取胃、脑、肝、肺等脏器作为样品，一般取分析量的3倍，在干燥，洁净的容器内剪碎或捣碎，用10%的酒石酸酸化，加热煮沸。 样品采集和保存 各种挥发性毒物的馏出顺序为氢氰酸，醛类，酮类，苯胺，硝基苯，因硝基苯馏出时间较晚，所以开始用15%氢氧化钠溶液吸收一些酸，醛类，弃去，然后用50%乙醇收集10-30mL馏液，并尽快检测。 四 尿中对硝基酚的测定 （一）邻甲酚分光光度法 1 原理 尿样经水解后，结合的对硝基酚转化为游离形式，用有机溶剂萃取对硝基酚，再用强氧化铵溶液反萃取，用三氯化钛还原对硝基酚，生成的对氨基酚与邻甲基酚作用，形成靛酚蓝，于620 nm波长处比色定量。 尿中对硝基酚的测定 2 样品处理和测定 尿样加水，盐酸酸化，沸水浴加热1h，冷却，加入异戊醇（溶剂为石油醚和乙醚）溶液，萃取。有机相加氢氧化铵溶液，振荡，取水相，加邻甲酚溶液，再加三氯化钛，振荡，至黄色沉淀变为淡黄色沉淀。过滤，在620 nm波长下比色定量。 尿中对硝基酚的测定 注意事项： 1 沉淀变为淡黄色，再测定。 2 在碱性条件下，30 min就可显色完全，颜色在120 min内保持稳定。 （二）高效液相色谱法 略 第三节 三硝基甲苯 一 理化性质 三硝基甲苯（trinitrotoluene，TNT）难溶于水，微溶于汽油，石油醚和乙醇，易溶于丙酮，苯，乙酸甲酯，甲苯，四氯化碳，乙醚等，受热易爆炸。 二 代谢和生物监测指标 TNT可经皮肤、呼吸道及消化道进入人体。在生产环节，主要经皮肤和呼吸道吸收。 TNT有较强的亲脂性，很容易从皮肤吸收。进入体内，在肝微粒体和线粒体的参与下通过氧化，还原，结合等途径进行代谢。具体过程如下： 代谢和生物监测指标 1 甲基氧化为羟基，进一步氧化为羧基及苯环被氧化为酚类。 2 硝基被还原为氨基。经尿排出。 3 结合反应为TNT的代谢产物。其中4-氨基-2，6-硝基甲苯可作为职业接触的生物指标。 此外，原形TNT是另一个检测指标。 代谢和生物监测指标 TNT可在体内接受来自还原型辅酶II的一个电子，转化为TNT硝基阴离子自由基，产生大量活性氧，使体内还原性物质如谷胱甘肽、还原型辅酶II明显降低。 进一步影响蛋白巯基的含量。 此外，还可诱发脂质过氧化，引起细胞内钙稳态紊乱。细胞代谢紊乱，导致死亡。 肝脏是TNT毒作用主要靶器官，导致肝大，脾大。以及影响