糖蛋白和脂蛋白精读.ppt

蛋白质与糖类和脂类的相互作用 一、蛋白质与糖类的相互作用 主要内容： 糖蛋白的研究概况 糖蛋白的种类和分布 糖蛋白的结构 蛋白聚糖的结构 糖蛋白和蛋白聚糖的生物功能 1.1 糖蛋白的研究概况 1890年, Hofmeister等首先将糖蛋白-卵白蛋白结晶； 1895年, Hammersten等在教科书中提出糖蛋白的概念; 20世纪30~40年代研究并明确糖蛋白中糖基结构、成分及部分生物学功能； 20世纪50年代初Leloir等人阐明了糖蛋白中糖基的生物合成； 20世纪60年代认识了糖蛋白中两种糖苷键的类型； 20世纪70年代后进行了对糖蛋白细胞内合成及基因克隆与表达的研究，有些制备了单克隆抗体，进一步对其抗原决定簇进行了分析与测定，从而推动了对糖蛋白的深入研究。 用于糖蛋白研究的技术 A. 气-质联用：糖基中单糖组成、顺序； B. 凝集素亲和柱：分离出糖蛋白上糖链的某些特性天线, 研究糖链与细胞生长发育和癌变的关系； C. 放射性同位素标记：检测极微量物质； D. HPLC：分离和结构测定、定性和定量分析； E. NMR：测定糖蛋白的空间结构及结构定性； F. 单克隆抗体：糖链结构的测定 1.2 糖蛋白的种类与分布 概念：糖蛋白是一类由糖类与多肽或蛋白质以共价键连接而成的结合蛋白。 总体分类：糖蛋白和蛋白聚糖 根据糖蛋白的分布和功能相结合的分类： 1.3 糖蛋白的结构 （一）常见糖苷键类型 糖链中糖基的种类和数量相差很大，常见的单糖种类已超过10种，糖链中糖基数量可由1~30。 糖残基间的连接键称为糖苷键，已发现的有N-型糖苷键、O-型糖苷键、S-型糖苷键、C-型糖苷键等。最常见的是前两种。 1.3.1 N-型糖苷键 N-糖苷键：由GlcNAc 的 ?- 异头C与Asn 的 ?-酰胺N原子共价连接形成的。 N-糖苷键在血浆糖蛋白中常见，故N-糖链又名血浆蛋白型糖链。 所有的N-糖链都含有一个共同的结构花式：核心五糖（三甘露糖基核心）。 1.3.1 N-型糖苷键 根据此核心连接区连接其它单糖残基的情况可分 A. 单纯型：核心区糖链上仅连接Man B. 复合型：核心区糖链上除Man外，还连有 GlcNAc, Gal, SA, Fuc等 肽链特点： N-型糖苷键连接的糖链常在的Asn-X-Ser顺序的片段中出现。其中 X：极性，复合糖链；非极性，单纯型糖链 1.3.2 O-型糖苷键 此种连接有以下类型： GalNAc-Ser(Thr)：除GalNAc外，Gal, GlcNAc, SA, Fuc等也可以与Ser/Thr连接. 多见于红细胞膜、IgA1和黏液蛋白中； Gal-Gal-Xyl-Ser: 还可以连接糖醛酸等糖基； Glc-Gal-HOLys: 主要存在于胶原中。 Ara-HOPro:主要存在于植物和海藻类的糖蛋白中。 （二） 糖链种类和数量的差异 同一个糖蛋白中可以有多种类型的糖苷键: N-型和/或O-型； 同一个糖蛋白中可以只有单一型糖链、复合型糖链，也可有单一型和复合型两种糖链； 有的糖蛋白中只有一个糖链，如牛核糖核酸酶B；有的糖蛋白中有800个以上糖链，如羊颌下腺糖蛋白。 （三） 糖链的生物学功能 在糖蛋白新生肽链折叠和缔合中的作用 N-糖链参与新生肽链的折叠，维持蛋白质的正确构象； 寡聚蛋白质中的糖链能影响亚基的缔合。 糖链影响糖蛋白的分泌和稳定性 糖链参与分子识别 1.4 蛋白聚糖的结构 概念：一类特殊的糖蛋白，由一条或多条糖胺聚糖和一个核心蛋白共价连接而成。 蛋白聚糖糖链的种类：透明质酸、4-硫酸软骨素、6-硫酸软骨素、硫酸角质素、硫酸皮肤素、硫酸类肝素、肝素等。 蛋白聚糖糖链的结构特点：分子巨大，分子不分支，分子结构中有重复的二糖单位： [己糖醛酸-己糖胺]n，n=30~250。 透明质酸（Hyaluronic acid, HA） 高等动物组织中发现(细菌中也有存在)，主要存在于结缔组织如眼球玻璃体、鸡冠、脐带、软骨等组织。主要功能是在组织中吸着水，有润滑剂作用，对组织起保护作用。 糖胺聚糖中结构最简单的一种， D-GlcUA与D- GlcNAc以?-1, 3相连构成重复的二糖单位，二糖单位以?-1, 4连接，分子链状、无分支，分子量很大，可达1000万以上，分子中不含硫酸取代基，生理pH下为多聚阴离子。 硫酸软骨素（Chondroitin sulfate, CS） 软骨的主要成分，广泛存在于结缔组织、筋腱、皮肤等。分子量一般低于10万（约250个重复二糖），个别可超过30万. 有4-硫酸软骨素（硫酸软骨素A）和6-硫酸软骨素（硫酸软骨素C）两种，二糖单位为D-GlcUA与GalNAc以?-1, 3相连，二糖单位以?-1, 4连接。糖链生成后由