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紫杉醇 ——治疗癌症的最后一道屏障！ 紫杉醇（paclitaxel/taxol） 发现历史： 1963年美国化学家首次从一种生长在美国西部大森林中称谓太平洋杉树皮和木材中分离到了紫杉醇的粗提物。实验发现这种粗提物对离体培养的鼠肿瘤细胞有很高活性，并开始分离这种活性成份。 直到1971年，利用X射线分析才确定了该活性成份的化学结构——一种四环二萜化合物，并把它命名为紫杉醇（taxol）。 红豆杉及其果实 紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物。 红豆杉的红豆，宛如南国的相思豆。红豆杉得名也是因为它生长着与红豆一样的果实。 紫杉醇是目前所了解的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物。 微管 α-微管蛋白 β-微管蛋白 微管功能： 1-支架作用 2-细胞内运输 3-形成纺锤体 4-纤毛与鞭毛的运动 紫杉醇属有丝分裂抑制剂或纺锤体毒素，和目前常用的化疗药作用机理不同，它诱导和促进微管的装配。紫杉醇具有聚合和稳定微管的作用，致使快速分裂的肿瘤细胞在有丝分裂阶段被牢牢固定，使癌细胞复制受阻断而死亡。 药理毒理 1-过敏反应 2-严重中性粒细胞减少 3-周围神经病变 4-心血管毒性 5-肌肉关节疼痛 6-脱发 7-胃肠道反应 0.39 0.47 0.62 0.30 0.55 0.80 0.59 注意事项： 1.有过敏史者及白细胞／血小板低下者应慎用；怀孕和哺乳期妇女禁用。 2.在给药12小时和6小时前服用20mg地塞米松。 3.滴注开始后每15min应测血压、心率、呼吸一次，注意有无过敏反应。 4.注药后每周应检查血样至少2次，3~4周后视情况可再重复。 紫杉醇引起的各种并发症 紫杉醇制剂居世界抗癌药首位 1990年进入III期临床试验； 1992年底获美国FDA批准上市； 1999年美国市场销售额为8.17亿美元； 2003年全球总销售额超过20亿美元并以20%/年的速度递增； 2006年，紫杉醇制剂的国际市场总销售额已达37亿美元，高居世界抗癌药物之首。 紫杉醇针剂 市售成品一般为注射液 性状：无色或淡黄色透明粘稠液体 规格：5ml/30mg 适应症：卵巢癌和乳腺癌，对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也都有一定疗效。 用法用量：将紫杉醇用5%葡萄糖生理盐水稀释成0.3~1.2 mg/ml溶液，静滴3小时。 价格昂贵 国际市场上高纯度紫杉醇（98%）价格在40万美元/kg以上。 原因： 1.红豆杉数量少，生长速度缓慢 野生红豆杉一般散生在海拔2500-3000米的深山密林中，自然条件下成材需50~250年。 2. 紫杉醇含量极低 一般含量仅为万分之几，含量最高的曼地亚红豆杉也仅为 0.03%~0.06%。 1kg100年树龄的树皮，仅仅能获得50~100mg的紫杉醇。 3. 紫杉醇分离纯化困难 类似物多, 具有热敏性, 产物在提取过程中易于分解、变性, 不同产地、不同季节的植物资源成分相差甚远, 因此分离提取工作难度很大。 紫杉醇分离纯化工艺 ——以5t红豆杉树皮为原料生产紫杉醇的中试工艺 工艺要点 红豆杉树皮预处理 采集新鲜的原料晒2~6d七成干后，再置于通风处阴干。经抽样检验紫杉醇的平均含量为0.012%。 2. 粉碎 粉碎室内的温度一般不能超过60℃，采用功率和容量尽量大的粉碎机，粉碎的粒度以40目左右为宜。 3. 95%乙醇浸取 原料+2700L 95%乙醇 浸取24h 残渣+1600L 95%乙醇 浸取24h 残渣+1500L 95%乙醇 浸取24h 残渣 残渣 浸取液 浸取液 作为下一轮第一次浸取的溶剂 1100kg糖浆状浸膏 4. 液液分配（萃取剂：氯仿） 液液分配过程中极易发生乳化现象，严重影响成本和产物的收率，所以这一步骤是分离纯化紫杉醇的难点之一。 应对方法： 浸膏中的乙醇浓度是液液分配的关键。真空浓缩浸取液制备浸膏过程中调节乙醇含量，使液液分配器中水相的乙醇浓度控制在10%~15%。 加水量也影响萃取效果，加水过多会出现严重的乳化，太少会使萃取过程分层困难。操作过程中，以1：2~1：3的体积比控制加水量（每50L浸膏加水100~150L）。 每份料液用氯仿萃取4次。依此加入氯仿50L、20L、15L、10L。每次搅拌时间30min，静置2h。 浸膏 水 料液 搅拌30min 氯仿 静置2h 含有紫杉醇的氯仿萃取液 5. 真空浓缩与拌样 经萃取的氯仿溶液在40 ℃以下真空浓缩。 按照固含量：硅胶（60~100目）为1：3的比例拌样、蒸干（干法上样）。 6. 硅胶柱层析—关键步骤 视镜 玻璃视镜 空白硅胶 拌样硅胶 流动相槽 接溶剂 接N2钢瓶 接真空 工艺特点： 干法上样 梯度洗脱 三次过柱 装柱好坏严重影响分离效果 采取措施： 底部抽真空 用木榔头连续敲击柱子四周